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1964年,J.C.Moore首先研究成功凝胶渗透色谱。其除了能够用来分离和鉴定小分子物质,而且还能够用于化学性质相同分子体积不同的高分子同系物的分析。定性定量分析糖类、醇、脂肪酸、脂类以及检测水性和油性高分子聚合物的分子量大小及分子量分布为凝胶色谱仪的主要用途。下面就让小编带你了解一下凝胶色谱仪的基本原理。
基本原理
校正原理
校正曲线指的是一条使用校正曲线用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做出的淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应关系曲线。单分散的标准样在聚合物中几乎找不到,用于替代的通常为窄分布的试样。将一系列的GPC标准谱图做出来,与不同相对分子质量样品的保留时间相对应,通过lgM对t作图,所得曲线就是校正曲线。各种所需相对分子质量与相对分子质量分布的信息能够利用校正曲线从GPC谱图上计算出来。可以将标准样制得的聚合物比较少,没有标准样的聚合物,校正曲线就不可能有,使用GPC方法,聚合物的相对分子质量和相对分子质量分布也不可能得到。对于这种可以使用普适校正原理。
普适校正原理
因为分子流体力学体积是GPC对聚合物的分离的基础。也就是对于相同的分子流体力学体积,在同一个保留时间流出,就是流体力学体积一样。
分离原理
化学惰性为凝胶所具有,吸附、分配和离子交换作用凝胶不具有。从一根内装不同孔径的色谱柱通过被测量的高聚物溶液。粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)为柱中可供分子通行的路径。当聚合物溶液从色谱柱(凝胶颗粒)流经时,粒子的小孔阻拦了较大的分子(体积大于凝胶孔隙),仅可以通过粒子间的间隙,有较快的速度;但是粒子中的小孔能够通过。通过的速度要慢许多;较大的孔隙能够渗入中等体积的分子,然而受到较小孔隙的排阻,处于上面两种情况之间。从一定长度的色谱柱通过,按照相对分子质量,分子被分开,在后面(即淋洗时间长)的为相对分子质量小的,在前面(即淋洗时间短)的为相对分子质量大的。从试样进柱到被淋洗出来,所接受到的淋出液总体积叫做该试样的淋出体积。当确定仪器和实验条件以后,溶质的淋出体积相关于其分子量,越大的分子量,其淋出体积就越小。
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