氨基酸分析仪的洗脱过程和故障解决

用来进行蛋白质、肽及其他药物制剂的氨基酸组成或含量的测定的仪器，称为氨基酸分析仪。必须先蛋白质及肽水解成单个氨基酸，然后再进行氨基酸分析。其是以阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定为基准的离子交换色谱仪。下面就让小编带你了解一下氨基酸分析仪的洗脱过程和故障解决。

洗脱过程

1.在ph2.2的条件下，氨基酸都带正电荷，都会被吸附在阳离子交换树脂上，然而具有各不相同的结合强度。

2.氨基酸随着缓冲液在离子交换柱上流动不断地附,解吸附，因为氨基酸酸碱性、极性、分子大小等性质的不同，就会产生不同的吸附强度。

3.氨基酸不同，其离子交换树脂的亲和力也不一样：酸性氨基酸及羟基氨基酸＜中性氨基酸＜芳香族氨基酸＜城性氨基酸。

4.当流动相PH值提高的时候，就会减少氨基酸的正电荷，减弱吸附力，Z后从离子交换柱上洗脱下来。酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基酸为依次洗脱的顺序。

5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序一定;标准液各种氨基酸的浓度一定,洗脱峰的面积一定;通过这能够将样品中各种氨基酸的含量计算出来。

故障解决

故障现象1:基线漂移

产生原因1:管路漏液

判断方法1:用滤纸试漏

解决方法1:修复

产生原因2:分析柱被污染

判断方法2:分离度下降

解决方法2:长时间用緩冲液5(氢氧化钠溶液)再生或重新填充柱子

产生原因3:缓冲液不纯

判断方法3:缓冲液B1~B5逐个与茚三酮反应,对基线状况进行观察。

解决方法3:缓冲液和反应液使用优质试剂和超纯水配置。

产生原因4:除氨柱劣化。

判断方法4:氨峰很高

解决方法4:对氨柱重新填充。

故障现象2:泵1泵2压力都高

产生原因:反应柱被堵塞

判断方法:取下泵1泵2通往混合器的连接管路,此时若两个压力下降明显就能够断定

解决方法:取下反应柱往干净的容器中放入，并且将蒸馏水注入，利用超声波凊洗器凊洗半个小时，之后反装回原位利用泵2走水(用R3),根据压力对流量进行设定，从小到大一直到压力正常为止，Z后恢复反应柱到原状。