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FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与GX液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。
近些年以来,在HPLC基础上发展出了新型色谱技术,包括低压液相色谱(LPLC)、中压液相色谱(MPLC)以及快速蛋白液相色谱(FPLC),在这些新型色谱技术当中,快速蛋白液相色谱(FPLC)可以非常迅速地分离复杂混合物,能够在短时间内对大量样品加以纯化。其特性表现为较大的容量、较高的回收效率以及不易失活的生物大分子等。能够越来越广泛地使用于生命科学研究及药物生产上。
HPLC与FPLC的异同
FPLC与HPLC的相同点:
输液泵、高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和计算机控制等设备均为FPLC与HPLC所采用,快速、分辨率高、分离效能高等特点FPLC与HPLC也均具备。
FPLC与HPLC的不同点:
由耐高压的塑料管组成FPLC的管道系统,由柱塞式泵驱动流动相,中低压,使用内径较大的色谱柱,分析精度较高,0~100 mL/min(Z大流速可达1 000 mL/min)为流速范围,分析精度低于HPLC,仅使用常规无机盐溶液,对于大规模纯化样品非常适用。
HPLC的管道系统所采用的材料大都为金属,往复泵或隔膜泵一起驱动流动相,高压,使用内径较小的色谱柱,有较高的分析精度,流速Z大一般不高于20 mL/min(有些制备级HPLC能够达到300 mL/min),有时一定浓度的有机溶剂需要被使用,对于微量样本检测或少量纯化制备君适用。
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