定氮仪使用注意事项

定氮仪使用步骤

diyi步，加酸以及加碱量的确定

按消煮样品时加入硫酸量计算出所需加入氢氧化钠的量，根据消煮液中氮的大约含量计算所需加入的硼酸量。根据计算量确定加碱时间和加硼酸时间。

第二步，开启机器

打开电源开关，显示屏上显示出“P”。按“转换”键，硼酸状态指示灯亮，按加好键或按减号键，设定加硼酸时间。再按“转换”键，使加碱状态指示灯亮，按加号键或按减号键，设定加碱时间。

第三步，将空的三角瓶放在托盘上，此时托盘处在高位。把装有样品的消煮管放在托盘上，要与上端的橡胶塞装紧。

第四步，按“启动”键，仪器开始自动向三角瓶中加硼酸，向消煮管内加碱，然后进入蒸馏状态，待三角瓶中冷凝液达到预定体积量时，三角瓶托盘落下，再蒸馏12s后蒸馏停止工作，发出提示声。在蒸馏过程中吸收液逐渐变成蓝绿色。若用手动蒸馏，要用pH试纸测试一下蒸馏液，根据酸碱性判断是否蒸馏结束。若pH试纸显中性或酸性，即说明蒸馏结束，若显碱性，需要再继续蒸馏直至显中性或酸性。

第五步，取下三角瓶，用酸滴定管滴定三角瓶中的液体， 颜色由蓝绿色变为砖红色，即到达终点。按含氮量-粗蛋白质含量公式进行计算，取得测定结果。

定氮仪使用的注意事项

(1)样品前处理注意事项

样品应尽量选取具有代表性的，大块的固体样品应用粉碎设备打得细小均匀，

液体样要混合均匀。

(2)模块化消解装置消化样品注意事项

消化过程中，首先确保浓硫酸量足够，如样品脂肪含量较高时，应适当增加硫酸量；其次对某些样品炭化易产生泡沫，这时可采用消解炉曲线升温或手动控制升温，让消解溶液沸腾均匀后再提高消解温度，直至消化液呈透明蓝绿色再消化0.5h或1h。因为炭化过程中，升温速度过快会使样品溢出消化管或溅起粘 附在管壁导致无法消化完全而造成氮损失，影响结果准确性。

(3)上机测定注意事项

仪器稀释水采用中性去离子水；蒸汽发生瓶内的水必须保持酸性；硼酸吸收液配制时应用中性去离子水，避免碱性物质的混入，盛装硼酸吸收液的容器应刷洗干净；碱液应用中性去离子水配置；滴定用的标准酸必须按照标准配制和标定。

上机测试样品前，应打开仪器预热，放一支消化管空蒸一次，排除蒸馏管路中的空气。

蒸馏时必须加碱，加入碱的作用一是中和硫酸，二是使溶液处于强碱性，这样才能使(NH4)2SO4变成NH3被硼酸吸收，通常是消化取用浓硫酸的四倍体积(40%NaOH)。硫酸铜可作为催化剂，并在蒸馏时作碱性反应指示剂，氢氧化钠是否足量。可借助硫酸铜在碱性条件下生成的褐色沉淀或深蓝色的铜氨络离子指示。若溶液的颜色不改变，则说明所加的碱液不足。

蒸馏是否完全，半自动定氮仪可用精密pH试纸测冷凝管的冷凝液来确定，中性说明已蒸馏完全。全自动定氮仪目前主要是以蒸馏体积与设置时间(经验值)确保蒸馏完全。

蒸馏结束后，滴定主要是是分为人工滴定和机器自动滴定计算和打印实验结果。要求操作者根据实际情况，按照要求操作。

(4)其它注意事项

1.若设定的加硼酸时间或加碱时间为零秒钟，则自动 工作过程完成后显示窗显示“E”不闪动，发出“嘀”声约2s提示音。

2.若按下“启动”键后，三角瓶托盘仍处于下端，显示窗显示自下而上闪动的“-”符号，并发出“嘀-嘀-嘀”的提示音，提示应放空三角瓶在托盘上，使托盘升起。

3.混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。

4.氨是否完全蒸馏出来，可用pH试纸测试馏出液是否为碱性。

5.向蒸馏瓶中加入浓碱时，往往出现褐色沉淀物，这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应生成氧化亚铜沉淀。

6.仪器应避免安装在阳光直射及过冷、过热或潮湿的地方，室内温度不得超过10℃—30℃，通风要好，应有良好的散热条件。

7.仪器前部槽皿中若积有液体，应经常擦净。

8.长期使用后，在加热器上会结有水垢，它将影响 加热效率。若水垢过厚，在关机状态下断电，可将蒸汽发生器顶上的一个旋塞拧下，在管口处插入一个小漏斗，注入除垢剂或冰醋酸清洗水垢(也可用稀释后的硫酸)。清洗后，打开机箱内蒸汽发生器排水节门将水排净，并加入清水多次清洗。

定氮仪使用需要考虑的几个问题：

1.样品在蒸馏装置中反复翻滚，对操作者构成危险么?

传统的定氮仪装置，可能会对实验人员存在潜在的危险。定氮仪蒸馏器就不会，它充分考虑了安全问题，在设计时增加了安全门装置，保证了实验人员的人生安全。同时，凯式定氮仪的剧烈翻滚，是因为水蒸气大量进入到消化管，此时凯式定氮仪有自身的超压保护装置，可以保持内部常压，不会对操作人员造成伤害。

2.对蒸馏装置中添加的水，有什么要求?

定氮仪的蒸馏水桶中装的水，要求是蒸馏水或者纯水，而且如果长时间地不用凯式定氮仪，Z好把蒸馏器中的水放掉。

3.定氮仪开机蒸馏器内不加水怎么解决?

开机半分钟中检查蒸馏水桶是否漏气，能被气充鼓是正常;检查蒸馏水桶内水位是否超过三分之一，不够补齐。

4.样品在消化炉时，可否对消化炉进行强火加热?

样品消化时，不能用强火。如果样品的糖分或者脂肪含量很高，那么我们一定要注意控制温度，以免大量泡沫喷出凯式烧瓶，造成人员的危险，同时测定结果也会受到一定的影响。消化炉，有水浴锅加热和电热板加热。水浴锅加热的Zda好处是受热均匀。

5.凯氏烧瓶的容量对实验会有影响么?

Z适宜多少容量的凯氏烧瓶，能够大大提升实验速率。一般我们选择800或者1000ml的，容量大的，能够缩短氨化时间，另外加热均匀性和氨化效率都比较好。在添加样品时，尽量不要将样品粘附在瓶颈上，以免影响实验结果。

6.消化炉在进行样品消化时，我们选择水浴锅加热还是用电热板?

一般我们采用水浴锅加热的方式。水浴锅加热均匀，温度上升稳定，大大提高消化效率，以及人身安全。

定氮仪使用的优缺点：

凯氏定氮法的主要优点是按照凯氏定氮原理设计的定氮仪运用化学、物理学、电学、自动控制等方面新技术采用可以批量处理样品，简单易于操作，对食品、农作物、肥料、土壤、水等物质中的氮、蛋白质含量进行定量测定，其结果精确可靠，且能够满足高通量检测要求，基本能够客观的反映出样品含蛋白质水平。同时还可以应用于挥发性盐基氮，二氧化硫灯物质的测定，应用范围广。

凯氏定氮法的主要缺陷是方法的特征性差，得到的测量结果只能代表样品中所有含氮化合物的总量，不能准确表示蛋白质的含量，这是因为在消化过程中除蛋白质中的氮转化成(NH4)2SO4外，一些非蛋白质类的含氮化合物(如生物碱、尿素、三聚氰胺等)也能转化成(NH4)2SO4，计算氮的含量时，认为所有的氮都来源于蛋白质，因此测定结果比实际值偏高，所以定氮仪也存在此问题。

因此，使用凯氏定氮法这一技术的前提便是：样品是真正的蛋白质样品，没有被造假。参照此前提，技术便能准确为人服务。

随着社会的进步，科学技术的发展。国内的分析仪器行业，也开始蓬勃发展起来，以前我国仅能生产半自动型，且技术含量低，可靠性差，水平落后，自动定氮仪只能依赖进口，并且价格昂贵。如今，我们已经生产出半自动，全自动定氮仪、肥料定氮仪。全自动定氮仪的技术含量Zgao，滴定系统采用官的方批准的颜色法滴定系统(AOAC, EPA, DIN, ISO,GB等明文规定)，柱塞泵采用高精度直线步进电机推进保证结果准确性。

综上所述，随着科技的进步，科研人员的努力，定氮仪已迈上一个新的台阶，并在食品中蛋白质的测定中定为国家标准方法(GB50095-2010食品中蛋白质的测定);而其它一些改进法有待进一步接受实践检验和完善。在保证准确度的前提下，定氮仪的改进向简便、gao效、系统化、自动化、智能化等方向迅猛发展，以满足各行业的不同需求。