高速逆流色谱影响因素

高速逆流色谱，英文名为High-speed Countercurrent Chromatography，HSCCC为其简称。其为美国国立卫生院Ito博士在1982年所研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。

高速逆流色谱影响因素

1.流速

两相的分布会受到流动相流速的影响。通常情况下，固定相流失随着流动相流速的增大而加重。然而流速过慢会造成过长的分离时间，从而导致浪费溶剂。

2.温度

溶剂的黏度会受到温度的提高的影响非常大，通常将温度提高会使高的保留值获得，反之，将温度降低就会使低的保留值获得，然而温度提高不会太多，因为所用的均为有机溶剂，具有较低的沸点。

3.转速

两相溶剂在流体动力学平衡时的体积比，也就是对固定相的保留值受到螺旋管的旋转速度的影响相当大，从而对分离效果产生了影响。当然也不是转速越快越好，一般对于分配不算好的溶剂体系，比如两相体系带有氯仿的，还要固定相分层比较慢的两相体系，一般情况下越快的转速，乳化现象越严重。

4.固定相的保留值

在逆流色谱中，对溶质峰分离度产生关键影响的一个因素即为留在管中固定相的量。高保留量将会使得峰分离度得到大大地改进。

（1）溶剂体系物理因素对保留值的影响

固定相的保留受到如溶剂的黏度等溶剂体系的物理因素的影响非常大，溶剂体系的黏度较低，能够得到的固定相保留就会很高，溶剂在临界点附近的分层时间受到界面张力和两相间的密度差的影响也比较大，通常为了使合适的固定相保留值得到保障，溶剂体系的分层时间就需要低于半分钟。

（2）仪器对保留值的影响

对两相互不混溶溶剂在旋转螺旋管内保留产生影响的关键因素之一为螺旋管支持件的自转半径与公转半径之比值。使用小直径的支持件减小值，可以使疏水性溶剂体系的单向性流体运动方向反向。相反，用大直径的支持件进一步提高值，可以造成亲水性溶剂体系的单向性流体动力学分布反向。而介于疏水性和亲水性溶剂之间的中间极性溶剂，离心力条件会对其两相分布状况产生影响。