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化学发光免疫分析仪的工作原理|校准方法|故障分析

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化学发光免疫分析仪是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。化学发光免疫分析仪包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。其中化学发光分析系统是利用了化学发光物质经果催化剂的催化和氧化剂的氧化,从而形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,就会同时发射出光子,利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统则是将发光物质直接标记在抗原或抗体上,或酶作用于发光底物。

化学发光免疫分析仪
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化学发光免疫分析仪的原理
化学发光免疫分析仪的原理|结构

  化学发光免疫分析仪广泛用于肿瘤标志物、激素等免疫类项目的检测,采用独有的磁性微粒子技术、超灵敏度光电倍增管及稳定的放大系统,具有高灵敏度、高稳定性、高准确性的特点。

化学发光免疫分析仪工作原理

  化学发光免疫分析仪以磁性微粒子为载体,以碱性磷酸酶为标记物,采用夹心法或竞争结合法,以发光底物AMPPD为基础进行免疫检测。

  化学发光免疫分析仪的工作流程:

  主探针吸取标本、试剂和磁性微粒并注入RV(反应)管中。稀释混合后的RV管被传送入孵育带进行孵育,以加速抗原与抗体的结合,并Z终形成固相包被(即抗体-抗原-酶标抗体复合体),接着RV管被送入清洗转盘洗涤2~3次,此期间磁性微粒包被在电磁场的作用下被吸附在RV管一侧以进行清洗,其未结合多余成分被吸出并排走。

  清洗好后,由基质液泵和基质液阀吸入发光底物AMPPD,并分配到RV管中,再次孵育以加强信号,此期间磁性粒子表面的碱性磷酸酶在催化作用下产生处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子,当该阴离子回到基态时会产生470nm的光,并被光电管检测而Z终产生结果。

化学发光免疫分析仪的结构

  1、转盘模块

  化学发光免疫分析仪转盘模块包括试剂盘、样本盘、样本架及各类附属监测部件。样本架上的杯/管通过3个红外传感器来检测,并可由对应的3个电位器来调整各传感器电压,当检测到杯/管时其电压应>3.9VDC,否则应

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化学发光免疫分析仪校准方法
化学发光免疫分析仪校准方法

  化学发光免疫分析仪由于其具有灵敏度高,特异性强,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法。新制造、使用中和修理后的化学发光免疫分析仪一般都要进行校准和测试。

化学发光免疫分析仪工作原理

  化学发光免疫分析仪是用发光剂直接标记抗体的一类免疫分析法分析仪。

  化学免疫分析原理是检测化学反应中,某些化学基因被氧化后形成激发态,当返回基态的同时发射一定波长的光子,利用这种化学基团标记在免疫分析的抗原或抗体上所建立起来的非放射免疫分析为化学发光免疫分析。此方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单,试剂价格低廉,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法。

  由于化学发光免疫分析仪的检测灵敏度和自动化程度非常高,因此它的准确度评价只能采用标准生化试剂在被检分析仪上严格按说明书操作,重复测量多次,看测定的结果是否与标准生化试剂的靶值相符合。

化学发光免疫分析仪校准设备

  1、校准设备与试剂

  标准生化试剂:免疫质控血清,不确定度为0.3%(k=2);移液管:50ml,A级;量杯:25ml;分度吸管:0.25ml,A级:电子交流稳压器:AC220V,1kW;混匀器。

  2、校准工作环境

  校准室内的温度为(20±5)℃:校准室内的相对湿度不大子80%;电源电压需经过电子交流稳压器的稳压:校准室内有较好的防尘措施:远离强电磁场的干扰。

化学发光免疫分析仪的校准方法

  1、外观

  用目测检查化学发光免疫分析仪的涂漆,镀层和玻璃器件;用手拨动各旋钮,开关和样品台,以及检查紧固件情况:分析仪有关的技术文件应齐全,其铭牌应字迹清晰。

  2、准确度的校准

  仪器准备:化学发光免疫分析仪与标准生化试剂在校准室内的温度平衡时间应不小于2小时;接通电源预热15分钟,将分析仪各开关和旋钮按分析仪的说明书进行预调。

  校准液的配制:本实验采用多项目免

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化学发光免疫分析仪故障分析
化学发光免疫分析仪故障分析

  化学发光免疫分析仪可定量检测艾滋病抗体、丙型肝炎抗体等项目,辅助诊断血液传播性疾病。它具有自动化程度高、操作简便、测定速度快、结果准确、特异性高等优点。同时也缩短了发报告的时间,提高了工作效率,而且减少放射性物质对人体的危害和对环境的污染。化学发光免疫分析仪使用过程中有时会出现一些故障,应用中遇到的常见故障及解决方法总结如下。

化学发光免疫分析仪的加样针故障

  1、加样针差值超出范围,故障多在停机超过24h后再开机使用时出现

  故障原因:可能是加样针、三通阀处产生结晶,洗后管路中仍有轻微堵塞现象,致使两针的差值过大。

  故障处理:用蒸馏水加压冲洗加样针,并用蒸馏水长时间浸泡三通阀,然后用活塞注射器除去管路结晶,故障排除。

  2、加样针的CV值过高

  故障原因:可能是由注射器杆前段塑料头变形导致定量不准或者是室温低于20℃所致。

  故障处理:首先明确室内温度,温度在20℃以上则更换变形配件;若温度在20℃以下则调高室内温度,使室温在25℃左右,如故障依旧,则更换变形配件。室温在20℃以上时,更换配件,故障排除。

  3、加样针的CV值偏低

  故障原因:可能是激发液注射泵的陶瓷阀被结晶堵塞,使激发液注射量不足所致。

  故障处理:拆下激发液注射泵,用蒸馏水长时间浸泡,待结晶完全除尽后再安装复位,故障排除。

  4、加样针无法初始化

  故障原因:可能是由于长时间工作引起针连接器前下部的2个触点出现变形,使触点和针不能形成短路状态而报警;或者由于漏液、结晶等原因使两触点问保持在短路状态,使加样针一直向下运动。

  故障处理:拆下针连接器,若是触点变形,则用外力进行矫正;若是触点焊点脱落,则用低温焊接,或者直接更换针连接器;如果是触点间存在结晶或者腐蚀现象,先用蒸馏水洗去结晶,然后再用乙醇清洗2个触点和针连接器,并实施干燥处理;如果是针连接器电路板上有结晶,则考虑清洁电路板。

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