液相色谱仪
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液相色谱仪
液相色谱仪是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相和固定相,又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。
现代的色谱仪具有稳定性、灵敏性、多用性和自动化程度高等特点。有气相色谱仪、液相色谱仪和凝胶色谱仪等。这些色谱仪广泛地用于化学产品，高分子材料的某种含量的分析...[查看全部]
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱及液-固色谱。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有GX、快速、灵敏等特点。
液相色谱仪的工作原理液相色谱仪利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异，使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。从液相色谱仪工作流程中看到，色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。
色谱填料：经过制备处理后，用于填充色谱柱的物质颗粒，通常是5-10粒径的球形颗粒。
色谱柱管：内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm，长250mm。
色谱柱：也称固定相，是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的，色谱柱的填充，干法填充：在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直台面墩10-20次。
湿法填充：又称淤浆填充法，使用专门的填充装置。
液相色谱仪的结构液相色谱仪的基本结构由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。
进样系统：
液相色谱仪一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
输液系统：
液相色谱仪该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为1.47～4.4×10^7Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。
分离系统：
液相色谱仪该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm(需要两根连用时，可在二者之间加一连接管)，
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液相色谱仪操作过程1、开机操作：
①打开液相色谱仪电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开Bootp Server(一般启动时已打开);
②自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时(有六行字符)，打开工作站(先打开Online);
③打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽)，控制流量大小，以能流出的Z小流量为准;
④注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于Zdi限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液;
⑤使用过程中要经常观察液相色谱仪工作状态，及时正确处理各种突发事件。
2、先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相)，正式进样分析前30min左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命。
3、建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果。
4、使用液相色谱仪手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡。
5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。
6、实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯。
7、关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，Z后自下而上关闭液相色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关。
8、使用者须认真履
... 查看全文液相色谱仪的应用也比较广泛，深受很多实验工作者青睐，使用液相色谱仪的过程中可能会有一些问题，比如日常维护保养需要注意哪些地方等等。
液相色谱仪流动相的要求是样品的组分在柱填料和流动相之间质量交换来达到分离的要求，所以实验室要求流动相需要举报下面几个特点。
1、纯度
流动相需要按照规定使用HPLC的试剂。使用的时候过滤去除里面的颗粒性杂质或者一些别的物质。如果溶剂里面杂质过多，会导致液相色谱仪色谱柱的寿命降低。
2、溶解度
样品的溶解度需要合适，不能过大或者过小。如果溶解的样品不好会导致柱头沉淀，不光是影响分离还会导致色谱柱使用寿命降低。
3、粘度
粘度要低(应 查看全文
液相色谱仪由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。
液相色谱仪分类方法1、按分离目的可分：实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。
2、按固定相物理状态可分：液液色谱仪和液固色谱仪。
3、按色谱柱形状可分：填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。
4、按分离原理可分：吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。
注：①吸附色谱：利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱：利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱：利用离子交换原理的达到分离的色谱。
5、按分离模型可分：线性液相色谱仪和非线性液相色谱仪。
6、按分离动力学过程可分：迎头液相色谱仪、顶替液相色谱仪和洗脱液相色谱仪。
7、按操作压力可分：低压液相色谱仪、中压液相色谱仪和高压液相色谱仪。
8、按结构可分：台式液相色谱仪和落地式液相色谱仪。
9、按分离规模可分：微型液相色谱仪、小型液相色谱仪和大型液相色谱仪。
10、按功能可分：分析型液相色谱仪和制备型液相色谱仪。
11、按用途可分：生物色谱仪、制药色谱仪、化工色谱仪、食品色谱仪、医用色谱仪、血液色谱仪、血清色谱仪、血浆色谱仪、蛋白色谱仪、蛋白质色谱仪、多肽色谱仪、氨基酸色谱仪、酶色谱仪、核酸色谱仪、RNA色谱仪、DNA色谱仪、细胞色谱仪、菌体色谱仪、抗生素色谱仪、维生素色谱仪、啤酒色谱仪、饮料色谱仪、果汁色谱仪、乳品色谱仪、淀粉色谱仪、发酵液色谱仪、酵母色谱仪、催化剂色谱仪、试剂色谱仪、植物油色谱仪、动物油色谱仪、矿物油色谱仪、石油色谱仪、原油色谱仪、油类色谱仪、矿用色谱仪、污水色谱仪、废水色谱仪、水质色谱仪、土壤色谱仪、农药色谱仪、试验色谱仪和专用色谱仪等。
GX液相色谱仪分类G
... 查看全文液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱及液-固色谱。由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与液相柱色谱装置比较，具有GX、快速、灵敏等特点。
液相色谱仪在医YF面的应用1、分离分析药物的组合含量：
由于一种药剂常含有多组分，液相色谱仪是既能分离又能定量的仪器。如脂溶性维生素片，含有铬维生素，有C18柱及含1%碳酸铵的甲醇为流动相。一次即可将各维生素B6、D1、A、E同时分离并定出含量。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。
2、药物生产中进行中间控制：
生产KJ素时，首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如：青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物，均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法，分析主体及其收产物的含量。液相色谱仪对普鲁卡因酰胺、茶碱等可进行主体含量的测定，对硝酸甘油可测定主体含量及其降解产物，以便保证药物的热量。
3、分析药物在体内的残量：
这是近来研究新药效能很主要的内容之一，如冬凌草甲素是植物中的一组分，有效果，但是毒性大。测定其在血清中含量很重要，现在可用C18柱及甲醇水为流动相，测定处理后的血清样品，即可得到血中的含量。如磺胺类药品在血清及尿中含量也不允许太大，可用C18柱及酸性乙醇为流动相，液相色谱仪测定含量后，则可估计Z合适的用药剂量。又如四环素、酸、止痛药、退烧药、护糖尿病的药物等，在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水为流动相来测定含量。因此，反相色谱法应用范围极广。
4、测定药物在各种器官中的代谢产物：
特别是研究药物的代谢产物在血清中存在的情况，如液相色谱仪测血清中的酮酸及戊二酸，测尿中代谢产物更为方便，不需要繁锁的预处理。因为研究尿中的组分能鉴别病人的代谢功能，对病理研究或监床诊断均具有重要的参考价值。
液... 查看全文液相色谱仪是一种常见的色谱分析方法，与气相色谱相比液相色谱可以在常温中操作，且不受样品挥发度和热稳定性的限制。这使得液相色谱仪非常适合相对分子量较大，难汽化，不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析。一台品质优良的液相色谱仪应从以下几个方面考虑：
一、主要技术指标优异
首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，Z小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱，进样阀，并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析的，而不是单单用个检测器或是泵的。然后在这个基础上，再去比较这些主要指标。
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1、噪音
是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求液相色谱仪的噪音越小越好，否则噪音过大将会导致基线不稳，甚至影响分析结果。
2、Z小检测浓度(Z小检测限)
是反映液相色谱仪灵敏度的重要参数。cl=2×nd×c/h(cl：Z小检测浓度nd:噪音c：样品浓度Z小检测浓度h：样品峰高)由上式可见，Z小检测浓度是和噪音成正比的，噪音越大，Z小检测浓度就越大，灵敏度就越低。某些厂家回避了这个指标，说明他们不愿在Z小检测浓度的基础上去比较噪音。
3、漂移
是指液相色谱仪稳定后一段时间内基线漂离原点的距离，通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了分析效率。
4、定性定量重复性
主要是考核液相色谱仪稳定性的指标，这对于分析样品来说
... 查看全文现代的色谱仪具有稳定性、灵敏性、多用性和自动化程度高等特点。有气相色谱仪、液相色谱仪和凝胶色谱仪等。这些色谱仪广泛地用于化学产品，高分子材料的某种含量的分析，凝胶色谱还可以测定高分子材料的分子量及其分布。
液相色谱仪和气相色谱仪的简介气相色谱仪：气相于分配层析或吸附层析，仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物(如磨细的耐火砖)上覆盖一层高沸点液体，如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。
液相色谱仪：通常任何气体均能无限混合，所以系统内无论含有多少种气体都是一个相，称为气相。均匀的溶液也是一个相，称为液相。
液相色谱仪和气相色谱仪的性能特点气相色谱仪：
具有GX能、高选择性、高灵敏度、分析速度快和应用范围广等特点。
①GX能：可以分析沸点十分相近的组分和极为复杂的多组分混合物，如用毛细管气相色谱仪可分析轻油中150个组分。
②高选择性：通过选用高选择性固定液可对性质极为相似的组分行有效分离，如同位素和烃类的异构体等。
③高灵敏度：配置高灵敏度的检测器可检测出10^-11～10^-13g/mL的组分，可用于痕量分析。
④分析速度快：一个分析周期几分钟至十几分钟，某些快速分析几秒钟可以分析若干组分。
液相色谱仪：
①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
②高速：液相色谱仪分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
③GX：液相色谱仪分离效能高。可选择固定相和流动相以达到Z佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用GX液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳
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沪公网安备 31011502008050号
