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细胞滚动粘附实验--间充质干细胞在胶原蛋白I表面的血栓
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细胞滚动粘附实验--间充质干细胞在胶原蛋白I表面的血栓
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2016-06-13 00:00
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人脂肪间充质干细胞- 采用患者脂肪经消化分离出人脂肪间充质干细胞，传代培养后冻存不同代次人脂肪间充质干细胞。[详细]
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载玻片细胞胶原蛋白I（COLLAGEN I）蛋白表达荧光- 主要用途载玻片细胞胶原蛋白I（COLLAGENI）蛋白表达荧光显微镜检测试剂是一种旨在运用抗胶原蛋白I型单克隆抗体以及荧光染料缀合物二抗，通过荧光显微镜分析胶原蛋白I型表达水平的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于各种活体细胞（动物、人体等）的胶原蛋白I型分析。产品严格无菌，即到即用，反应敏感，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。技术背景胶原蛋白（collagen）是一种纤维蛋白，存在于所有动物组织中，由纤维组织母细胞（fibroblast）合成，构成体内总蛋白含量的三分之一，是血管、心脏、肾脏、肝脏、皮肤、韧带、骨和软骨组织细胞外基质（extracellularmatrix）的主要成分。胶原蛋白分子由三个多肽链组成，其中含有三种氨基酸：甘氨酸（glycine）、脯氨酸（proline）、羟脯氨酸（hydroxyproline）。胶原蛋白由29种类型，其中90%是细纤维形成填隙式胶原（I、II、III和V型）和基底膜胶原（IV型）。I型胶原蛋白是体内Z为丰富，存在于疤痕组织、腱（tendon）、动脉血管壁、皮肤、骨组织、牙组织、肌原纤维（myofibrils）的肌内膜（endomysium）、纤维软骨（fibrocartilage）等。其异常将导致成骨不全（OsteogenesisImperfecta）、Ehlers-Danlos综合征（EDS）又名弹力过度性皮肤（cutishyperelastica）、婴儿骨皮质增生症（infantilecorticalhyperostosis）等疾患。[详细]
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2018-11-18 10:00
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2024-09-28 04:25
期刊论文
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- 小鼠I型胶原蛋白（CollagenI）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CollagenI单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的CollagenI与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠CollagenI，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，CollagenI浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中CollagenI浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：1000ng/ml1瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：设标准管7管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入1000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第六管中吸出300ul弃去。第七管为空白对照。加上原液管总共八管。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CollagenI含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的CollagenI检测浓度小于10ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的小鼠CollagenI。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]
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2018-09-13 10:01
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