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斑马鱼呼吸代谢及行为分析技术在生物医学领域的应用
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斑马鱼呼吸代谢及行为分析技术在生物医学领域的应用
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- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:48T0.3nmol/L-9nmol/L使用目的:本试剂盒用于测定斑马鱼血清、血浆及相关液体样本中胆固醇(C)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中斑马鱼胆固醇(C)水平。用纯化的斑马鱼胆固醇(C)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆固醇(C),再与HRP标记的胆固醇(C)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胆固醇(C)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中斑马鱼胆固醇(C)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(16nmol/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8nmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4nmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2nmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1nmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5nmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]
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斑马鱼实验注射泵
- 斑马鱼实验的**工具气动皮升注射系统-PV800系列仪器概况WPI公司的气动皮升泵通过使用调节的气压来固定细胞并注射液体,注射的体积范围从皮升到纳升不等,并具有的可重复性。正压和负压由单独的端口提供,正压主要用于高压喷射,负压用于吸附支持细胞及毛细管的填充,第二个压力端口在每次注射脉冲之间让毛细管保持低的正性维持压,以阻止液体通过毛细管虹吸作用或扩散的方式回吸。定时作用、喷射压力、维持压和吸附作用都是独立地通过仪器前板的控制旋钮和压力表来调节,注射时间通过前板的20圈调节器控制,内置定时电路可以极ng确控制注射压力应用到输出端口的时间参数,时间间隔范围从10秒到0.2毫秒可调(取决于喷射压力参数大小)。注射过程可以通过手动触发,也可以通过脚踏开关或计算机控制的TTL脉冲触发。仪器特征:1.操作简便:手动控制:轻按前板启动键或停止键操控。脚踏开关:脚踏开关灵活控制开始或停止。外部输入:通过计算机编程控制时间参数或TTL信号启动。2.双重模式:外部启动:通过计算机控制时间启动。内部启动:通过仪器内部晶体振荡器控制时间启动。3.计量准确:时间参数:从0.2毫秒到10秒,可以极ng确调节。体积准确:无论是皮升或微升,通过调节时间参数或压力参数均可以准确注射。4.可重复性:通过固定压力、时间,并保持口径一致,可以确保注射体积的可重复性。主要用途:●斑马鱼卵细胞注射――DNA、mRNA的基因信使的注射。●动、植物注射――大鼠、小鼠体内注射;――果蝇、家蚕等注射;――爪蟾、蛙类、斑纹螺体内注射;――水稻及树叶等遗传物质注射等。●药物及染料注射――微珠、神经递质、各种激酶的注射;――其它蛋白质的注射。[详细]
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2024-10-08 05:30
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