细胞融合仙台病毒法

在自发或人工诱导下，两个细胞或原生质体融合，使得一个杂种细胞形成，即是细胞融合(cell fusion)。

仙台病毒法

我们了解，凝集细胞的能力为很多病毒所具有。其一边在一个细胞表面黏接，另外一边在另一个细胞表面黏接，从而在病毒的作用，两个细胞靠近发生凝结。

仙台病毒又叫做日本血凝病毒HVJ，如果细胞被感染，那么会有某些改变在其表面发生，,使得这些细胞的融合非常容易发生，甚至死的HVJ病毒也会对细胞融合产生促进的作用。

日本学者冈田使两种不同的动物细胞在仙台病毒的作用下发生凝集，Z终融合。

根据研究可知：病毒的膜是主要的对细胞融合起到促进作用的有效部位，然而，使用超声波将病毒膜打碎，对细胞融合促进的功能其依然存在。

病毒内核酸的活性与仙台病毒促使细胞融合无关，病毒被膜上的磷脂成分和仙台病毒促使细胞融合相关。

仙台病毒被膜糖蛋白与其促融合的能力有关。在动物细胞融合中,仙台病毒(HVJ)已成为产生细胞杂种的标准融合剂。

 病毒促使细胞融合的主要步骤:

在病毒黏结作用下，两个原生质体或细胞彼此靠近。

两个细胞膜间互相渗透,胞质互相渗透是由于病毒与原生质体或细胞膜的作用。

两个原生质体的细胞核互相融合。

正常的细胞分裂途径被进入，含有两种染色体的杂种子细胞被分裂而成。

基因枪的注意事项

1、建议现用现配亚精胺，或者在零下20~℃冰箱中(时间不超过1个月)储存，如果保存时间过长或没有保存好，亚精胺会发生降解,从而会对DNA吸附于金属微粒表面的能力产生影响。

2、对于植物材料转化，受体材料决定了微粒zi弹载体的选择。除此以外，可裂圆片的规格必须对应微粒zi弹载体。

3、建议在枪击前将质粒DNA的储存浓度调至1ug/u1,如此对于微粒zi弹制备时的DNA取样非常的有利。建议以0.75~1Pg/mg(金粉)作为质粒DNA与金粉形成复合体的比例比较好。

4、对于转化率产生影响的重要参数有质粒DNA的纯度和浓度，0.75~1/1gDNA为通常每枪的量。