液相色谱仪示差折光检测器的原理及应用

　　示差折光检测器和紫外检测器、蒸发光散射检测器一样，也是液相色谱仪常用的检测器之一。由于各种物质具有不同的折射率，溶剂和样品各组分折射率存在一定差异，所以通过检测折射率的变化，就可以达到分析样品组分的目的。

示差折光检测器的原理

　　任意一束光由一种介质射入另一种介质时由于两种介质的折射率不同而发生折射现象。折光率是一个无量纲的常数，光在真空中的速度和光在某种介质中的速度之比定义为该介质的折射率，其大小表明了介质光密度的高低。示差折光检测器是通过连续测定色谱柱流出液折射率的变化而对样品浓度进行检测的。

示差折光检测器的特点

　　1、通用型检测器;

　　2、灵敏度不高，检测限在10^-6g/ml~10^-7g/ml;

　　3、对压力和温度很敏感;

　　4、对流动相的要求低;

　　5、不能用于梯度淋洗。

　　示差折光检测器是一种非选择性液相色谱仪检测器，基本上对所有被测对象均有响应，但灵敏度较低，不适合做痕量分析，也不适合作梯度洗脱。示差折光检测器多用于制备色谱和凝胶色谱，也用于糖类等无吸收物质的分析。

示差折光检测器的保养

　　1、示差折光检测器对含盐类流动相比较敏感，不要让仪器里有盐类、粘度大的样品、强酸强碱的样品残留;

　　2、用做液相色谱仪实验时，先把液相泵用甲醇变换流速冲洗1小时，然后用实验所需的流动相冲洗1小时，再接上专用色谱柱色谱柱冲洗1小时(别接检测器)，Z后把色谱柱接到检测器(示差检测器可以先通电升温达到要求的温度)上，待基线走平做实验;

　　3、做完实验，用两通取代色谱柱，用甲醇冲洗整个液相系统至少1小时，再关闭液相系统(如果是含盐类的流动相、粘度大的样品、强酸强碱的样品，变换流速冲洗整个液相系统至少2小时，再关闭液相系统);

　　4、冲洗后的液相系统及其检测器若长期不用，泵和检测器的各个接口用封口膜封上(特别是大的接口处一定要封口膜封上)，避免进入灰尘或爬入小生物造成不必要的麻烦;

　　5、尽量专柱专用，避免影响检测结果;

　　6、若是基线不稳，不接色谱柱、检测器，用纯水冲洗系统30分钟，再接示差检测器冲洗。一切正常后，接上冲洗好的色谱柱，待基线平稳后可以进样。

示差折光检测器和紫外吸收检测器的区别

　　示差折光检测器和紫外吸收检测器各自的优点：

　　紫外吸收检测器它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。示差折光检测器这一系统通用性强、操作简单。

　　示差检测器属于总体性能浓度型检测器，其响应值取决于柱后流出液折射率的变化，采用含有样品的流出液和不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。其响应信号与溶质的浓度成正比。属于中等灵敏度检测器，检测限可达1mg/ml-0.1mg/ml。

　　紫外检测器灵敏度高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度均不敏感，可于制备色谱。由于灵敏高，因此既使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。

　　示差折光检测器是目前液相色谱中常用的一种检测器，它可与输液泵，色谱柱，进样器等组成凝胶渗透色谱仪或高速液相色谱仪系统，也可以配置适当的进样系统作为单独的分析仪器使用。对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等，可用示差检测器检测。由于不同的液体折光不同，因此本检测器通用性强，可广泛地应用于化工、石油、医药、食品等领域为科研、生产服务。

　　紫外检测器有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱，示差检测器几乎对所有溶质都有响应。

　　示差折光检测器和紫外吸收检测器之间的区别：

　　示差折光检测器这一系统灵敏度低(检测下限为10^-7g/ml)，流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。

　　①紫外是选择性检测器，示差是通用性检测器;

　　②紫外检测器灵敏度高，示差检测器灵敏度低;

　　③紫外检测器可进行梯度洗脱，示差检测器不能进行梯度洗脱;

　　④紫外检测器对压力和温度不敏感，示差检测器很敏感。

　　示差检测在原理上虽然是通用型检测器，但是它的灵敏度低，和梯度脱洗不相容，因此它对于液相色谱仪来说不是理想的检测器。而紫外检测器既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。