表面等离子共振技术检测原理

表面等离子共振技术，简称SPR，是从20世纪90年代发展起来的一种新技术，对在生物传感芯片（biosensor chip）上配位体与分析物之间的相互作用情况的检测是SPR应用原理。在各个领域得到广泛地应用。

检测原理

表面等离子共振（SPR）为一种光学现象，能够用于天然状态下生物分子间的相互作用的实时跟踪。这种方法不仅对生物分子没有任何损伤，而且不需要任何标记物。

首先在生物传感器表面键合上一种生物分子（靶分子），然后再在生物传感器表面注入含有另一种能与靶分子产生相互作用的生物分子（分析物）的溶液并使其流经生物传感器表面。生物传感器表面质量由于生物分子间的结合而增加，从而使得折射指数按同样的比例增强，就能够观察到生物分子间反应的变化。使用应用反应单位（RU）[1 RU = 1pg 蛋白/mm2 = 1 x 10-6 RIU（折射指数单位）]来衡量这种反应。

在注入分析物的过程中，由于经过对流和扩散流的相互作，使得复合物通过表面和靶分子而形成，从而改变了分析物浓度。这种浓度的改变因为微射流系统内nL数量级流动通道的应用而降至Zdi点，使高传质系数（Mass Transport Coefficient，km）得到保证。键合在生物传感器表面的靶分子浓度必须比较低以便使分析物的传质性不受到限制得以保证。当注入分析物的时候，在生物传感器表面形成了分析物-靶分子复合物，使得反应增强。而当结束注入分析物后，分析物-靶分子复合物解离，使得反应减弱。动力学常数能够通过结合式相互作用模型拟合的这种反应曲线得以确定。通过参照曲线减除功能能够驱除非特异性结合和总折射指数移相等效应。