琼脂糖凝胶电泳操作步骤

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。

一、配胶

根据所要分离的DNA分子的大小，对琼脂糖粉末进行适量的称取，再锥形瓶中放入称好的琼脂糖粉末，再将适量的1×TAE电泳缓冲液。

然后在微波炉内放入溶液加热摇匀到完全溶化呈现透明状，适当冷却后再将其往胶托内倒入。

在胶完全冷凝后将其放入电泳槽，胶面必须完全浸没于电泳槽的缓冲液里。

二、点样

由于样品之间的差异，点样体系也不相同，点样体系包括如下两种：

1.样品能够直接进行点样。

2.样品+6Xloading buffer

Z后要记住点marker，并且将胶的位置摆正。

三、电泳

点样完成后，将电源连接上，将电源的参数设置好，开始电泳。当溴酚蓝（蓝色）移动到一定的长度，电泳就能够停止。

电压的要求为：每1厘米胶小于需要不超过20伏特的电压样品出孔时，使用1厘米胶3伏特的低压15分钟，然后将电压调回到标准电压，能够跑出比较好的条带。

四、EB染色

溴化乙淀为一种扁平分子，它能够往核酸双链的配对碱基之间嵌入，当紫外线对EB-DNA复合物照射的时候，其有不一样的效应出现。

值得注意的是：要对污染区和非污染区严格地区分，不要往非污染区放入从污染区拿到的物品，应当要及时丢弃碰到过EB的手套。

五、成像拍照

图像的摄录，处理和打印通过图像分析系统一体化。为了使条带不丢失，使摄录凝胶图像在低照度下的灵敏度有所保证，需要采用高分辨率的CCD。

六、胶图分析