固相萃取仪的使用操作

固相萃取是近年发展起来一种样品预处理技术，由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来，主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。

固相萃取仪使用操作步骤

固相萃取仪针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质)，操作稍有不同。固相萃取操作一般有四步:

1.填料保留目标化合物

活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。

萃取前先用充满小柱的溶剂冲洗小柱或用5-10ml溶剂冲洗滤膜使SPE填料保持湿润，因为填料干燥会降低样品保留值，而各小柱的干燥程度不一，也会影响回收率的重现性。先用甲醇等水溶性有机溶剂冲洗填料，因为甲醇能润湿吸附剂表面，并渗透到非极性的硅胶键合相中，使硅胶更容易被水润湿；然后再加入水或缓冲液冲洗，创造和样品溶剂相容的环境并提高回收率。

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上样----将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。

一般可采取以下四种方法：

(1)用0.1mol/L酸或碱调节，使pH9，离心取上层液萃取；

(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白质后取上清液，以水或缓冲液稀释后萃取；

(3)用酸或无机盐沉淀蛋白质后取上清液，调节pH值后萃取；

(4)超声15min后加入水、缓冲液，取上清液萃取。流速应控制为1ml/min，流速快不利于待测物与固定相结合。

淋洗----Zda程度除去干扰物。

反相SPE的清洗溶剂多为水或缓冲液，可在清洗液中加入少量有机溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液应不超过一个小柱的容积，而SPE滤膜为5～10ml。

洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。

应选用5～10ml离子强度较弱但能洗下待测物的洗脱溶剂。若需较高灵敏度，则可先将洗脱液挥干后，再用流动相重组残留物后进样。体内样品洗脱后多含有水，可选用冷冻干燥法。保留能力较弱的SPE填料可用小体积、较弱的洗脱液洗下待测物，再用极性较强的HPLC分析柱如C18柱分析洗脱物。

若待测物可电离，可调节pH值，yi制样品离子化，以增强待测物在反相SPE填料中的保留，洗脱时调节pH值使其离子化并用较弱的溶剂洗脱，收集洗脱液后再调节pH值使其在HPLC分析中达到Z佳分离效果。在洗脱过程中应减慢流速，用两次小体积洗脱代替一次大体积洗脱，回收率更高。

2.填料保留杂质

固相萃取操作一般有三步:

活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。

上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，开始收集。

洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。

此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。

固相萃取仪的使用操作的简要过程

1.一个样品包括分离物和干扰物通过吸附剂；

2.吸附剂选择性的保留分离物和一些干扰物，其他干扰物通过吸附剂；

3.用适当的溶剂淋洗吸附剂，使先前保留的干扰物选择性的淋洗掉，分离物保留在吸附剂床上；

4.纯化、浓缩的分离物从吸附剂上淋洗下来。

固相萃取仪的使用操作注意事项

不正确的使用固相萃取仪会导致触电或火灾事故。为防止发生危险情况，请在安装使用、维护和清洁固相萃取仪时遵照下述指引。为确保您的安全及延长固相萃取仪的使用寿命， 保持固相萃取仪的使用质量，请仔细阅读下述安全注意事项。

1、向该装置提供的真空压力不应大于0.1Mpa。

2、固相萃取柱与接头应安装配合好，当发现系统总是达不到设定压力时，请检查各接头是否拧紧，气压盖密封垫是否平整。

3、玻璃器件在操作过程中请一定放置平当。

4、系统配有12支流量阀开关，当某一路不使用时，可将其关闭，以保证系统保持一定压力。

5.电源线应妥善设置，避免被人踩踏和物体挤压。

6.交流电源插座和延展电线不可过荷，过荷会引发火灾或触电事故。

7.请勿将任何异物通过通风孔或开口塞入机内，请勿将水或其它液体溅到机箱的控制面板上。