DNA测序胶片显影步骤

手工测序以及自动测序均属于DNA序列测定，手工测序可分为maxam-gilbert化学降解法与sanger双脱氧链终止法，事实上，目前dna序列分析的主流是自动测序。373型、377型、310型、3700和3100型等多种型号DNA测序仪均已经被美国pe abi公司生产出来了，在这几款DNA测序仪中，临床检测实验室使用Z多的一种型号要属310型。

EDF胶片显影

EDF胶片的使用能够使得测序条带的对比度增强，若测序胶上条带非常淡，那么Z好网EDF胶片转移数据，在EDF胶片转入银染胶影像以后能够使得条带可读性增强。

1. 在暗室内，在荧光灯箱上放置染色过的粘于玻璃板的凝胶（胶面向上），若有合适的漫射板，也能够使用白灯箱，为了使曝光时间得以确保，在不同时间用一小条EDF胶片进行曝光，对不同的曝光强度进行检查，通常曝光20～40秒，就能够使比较好的结果获得。

2.将EDF胶片有缺刻的一角在红灯下找到，然后在凝胶上放置胶片，使缺口位于左上角。因为EDF胶片是单面的，所以使缺口在左上角必须确保。

3.将一干净、干燥的玻璃板放置在EDF胶片上。

4.手工显影EDF胶片步骤

（1） 在Kodak GBX显影液中显影1～5min；

（2） 水洗1min；

（3）在Kodak GBX定影液中定影3min；

（4）水洗1min。

意义

DNA测序方法的飞速发展除了使人类的全基因组序列为我们所知晓，而且还使得我们充分掌握了小麦、水稻、家蚕以及很多细菌。此时，科学家们的新目标也就变成了对一段序列所代表的生物学意义的探明。用于编码基因仅仅只有1.5%存在于核苷酸组成的庞大序列中，除此以外，扮演调控基因表达的角色有少许，其中功能未知的“垃圾DNA”占绝大部分，这一发现是科学家通过分析人类基因组序列获得的。由表面可知，人与人之间有着缤纷复杂的不同之处，然而，深入到DNA水平上，却仅仅存在0.1%基因编码序列上的不同。大多数时候，人与人之间在一条序列上的差异只有一个核苷酸，科学家将这种现象命名为单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，简称SNPs）。

注意事项：

（1）曝光时间长，那么对于背景的减弱有所帮助，曝光时间短那么EDF胶片影像较深。

（2）为了对所用光源的Z佳曝光时间进行选择，胶片曝光不同时间。

（3）在EDF胶片显影之前必须完全干燥EDF胶片，为了不印上指纹需要戴手套进行操作，同时留心自动胶片处理器不能用。