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细胞识别参数对图像法细胞计数仪的重要性

2022-06-23 11:58:24  来源:贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 浏览量:62次
【导读】图像法细胞计数和活率分析仪,基本都是先拍摄得到细胞照片,然后把照片中的每个细胞通过设定好的识别参数进行分析标记,由软件统计死活细胞数并计算得到细胞密度和活率。

图像法细胞计数和活率分析仪,基本都是先拍摄得到细胞照片,然后把照片中的每个细胞通过设定好的识别参数进行分析标记,由软件统计死活细胞数并计算得到细胞密度和活率。


在此过程中,细胞识别参数给分析软件提供了标准,帮助判断哪些是细胞和哪些是活细胞,从而让我们看到了常见的绿色和红色标记的细胞照片(如下右图所示)。


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细胞识别参数设置不同会有何影响?

同样的一张细胞照片,细胞识别参数设置不同会让我们得到如下不同的照片和分析结果。


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从左到右为第1、第2和第3种不同细胞识别参数下分析得到的照片


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以上3张照片中绿色标记是活细胞,红色标记是死细胞,蓝色标记是非细胞颗粒。第1种细胞识别的照片中不少细胞被标记为了蓝色,所以总细胞密度只有4.18 x 106 /mL。第2种细胞识别的照片中活细胞很多都标记为了红色,所以虽然总细胞密度没问题,但活细胞密度减少到了4.70 x 106 /mL,相应的细胞活率下降到了82.3%。而第3种细胞识别参数得到了比较准确的分析结果,照片中的细胞都准确地进行了分析。


由此可见,细胞识别参数对图像法细胞计数仪很重要,设置不合适将会直接导致分析结果错误。


细胞识别参数的设置和优化,如何实现事半功倍的效果?


首先我们需要了解图像法细胞计数仪软件中的识别参数。

譬如Vi-CELL BLU软件中包含Minimum diameter, Maximum diameter, Cell sharpness, Min circularity, Decluster degree等参数(如下图所示),我们可以在操作手册中查到这些参数相应的定义。根据这些定义做出调大或调小的设置,可以比较修改前后的识别效果,最 终让照片中的细胞都被正确标记。


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然后我们可以看下软件是否有数据再分析功能。


细胞识别参数的设置和优化,需要结合软件数据再分析功能,不然势必会导致劳而少功的结局。


试想一下,当我们的样品测试完后发现使用的识别参数不合适,此时软件没有数据再分析功能,只能通过重新上样检测以判断优化后的参数设置是否合适。这种操作势必要用掉不少样品和浪费操作人员的宝贵时间。


反之,如果我们可以通过数据再分析功能直接对测试数据进行参数的优化设置,就不需要再次上样检测,可以大大提高参数优化的效率。


如下所示是Vi-CELL BLU已测试数据的再分析操作界面,从左到右分别是细胞识别参数、分析结果和拍摄的细胞照片,操作人员可以在同一界面上完成参数优化后的实时再分析结果显示功能。


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最 后我们查看下分析软件是否可以显示单个细胞的识别参数。


当我们检查拍摄的细胞识别照片时,若发现有异常未识别到的细胞,可以直接选中该细胞查看对应的识别参数,即单个细胞的识别参数显示功能。以Vi-CELL BLU为例,如下左图可以看到有1个大颗粒标记为了蓝色(方框内颗粒),经过操作人员的辨识,该颗粒也是所需的活细胞。那我们就可以点击选中该细胞,查看显示的识别参数(如下左图中的数据)。


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然后,对照使用的细胞识别参数标准(Cell Type)中的参数。发现其中Maximum diameter设置是25um,而该细胞的直径是25.43um,所以该细胞标记为非细胞颗粒。那么,通过把Cell Type中Maximum diameter从25um改为50um,即可将该细胞识别为我们期望的活细胞(如上右图)。


所以,分析软件若具有对每个细胞的识别参数显示功能,那么结合数据再分析功能,将会使得细胞参数的优化过程由繁琐转为更加地简便。


综上所述,细胞识别参数对于图像法细胞计数仪检测细胞密度和活率非常重要,只有设置合适的参数才能得到准确的结果。但要设置合适的识别参数有时并不容易,需要我们对参数进行优化,而这需要我们了解每个识别参数的定义,并且通过数据再分析功能结合单个细胞的识别参数显示功能,从而可以更便捷地完成整个细胞识别参数的优化过程。


最 后,如果您是我们Vi-CELL BLU的用户,目前遇到细胞识别参数优化的问题,可以联系我们的当地销售或工程师,我们有《Vi-CELL BLU细胞识别参数的设置和优化》应用手册可以作为指南帮您顺利完成识别参数的优化操作。


标签:活率分析仪 , 细胞识别参数对图像法细胞计数仪
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