细胞实验室的“三件套”和“五还要”，划完这些重点，细胞表示你养我吧

历经三个多月的居家生涯，小 E 终于能重返办公室啦！相信大家都和小 E一样，激动的心，颤抖的手哪知刚返工回到实验室，就又遇上梅雨天气，细胞饲养员心里说不完的苦。

霉菌和各种不明微生物，会在不经意间污染细胞，让辛辛苦苦培养出的结果作废，给饲养员们造成毁灭性的打击。

我们的心声

污染远离我的胞胞！！！

在日常的防疫口号中，有“三件套”和“五还要”，今天小 E 也有这样一套口诀，用来保护实验室的细胞主子们。小 E 这就把这套”保命秘籍“分享给大家：

防护“三件套”

进入实验室，我们都已经换上实验服（白大褂），再进入到细胞培养区域，一定要严格执行——戴口罩、戴手套、换鞋（套）。

我们身上都携带细菌，它们存在于我们的皮肤、口腔和鼻腔。尤其当我们生病时，会携带更多的细菌，想必疫情下，戴口罩已经成了一种习惯。我们的手也是污染源，所以必须洗手后戴上手套。鞋子会沾染各种污物，如果穿着便鞋进入细胞培养实验室，你很可能被拉入实验室“黑名单”，切记换上拖鞋或者穿上鞋套，“三件套”穿戴规范后才能进入洁净区域进行操作。

（细胞实验汪的示范，图源网络）

牢记“五还要”

1、生物安全柜还要规范布局

在生物安全柜内杂乱摆放过多的器材使得工作空间过度拥挤，容易在在敞开容器上方移动手臂，这样会增加细胞污染风险。还容易阻挡气道，形成湍流，造成层流气流对屏蔽污染物的效果大打折扣。

规范布局生物安全柜内器材的摆放位置，划分不同的工作空间，有序操作，防止造成操作引发的污染情况。

https://www.bilibili.com/video/BV1H64y1S7JC/（点击查看 完整指导视频）

2、水浴锅还要定期清理

水浴锅是细胞复苏必备的设备，37℃ 条件下的水环境是细菌滋生的理想场所。很多时候我们都会遗忘水浴锅多久没有清理了，而且冻存管顶部很难保持干燥，一旦湿漉漉的冻存管被细菌所侵染，再怎么喷酒精都将于事无补。一定记得定期更换水和清理水槽，加入抑 菌剂或者 2% 的硫酸铜。

（隐藏的污染源——水浴锅）

如有条件可以选择金属浴加温设备，有专为冻存管设计的模块和程序，提高处理通量并快速解冻细胞进行复苏，最 大优势就是无水操作，可有效降低污染风险。

https://eppendorf.juplus.cn/eppendorf_single/#/channelTrack?id=116

（点击查看 为细胞复苏设计的金属浴加热设备）

3、CO2 培养箱还要全面维护

CO2 培养箱中的承液盘是日常维护的重 点，为维持箱内的湿度，我们需要补充蒸馏水。如果直接往盘中倒入蒸馏水，若已发生细菌污染，那承液盘就成了污染源。

应该定期（每周 1-2 次）将承液盘整体移出，将残留的水清空，用 70% 的酒精或异丙醇溶液擦拭消毒，待干燥后添加无菌蒸馏水，再放回培养箱内。

定期（每周或每两周 1 次）对 CO2 培养箱腔体进行清洁是预防污染有效且重要的维护工作，拆除培养箱的搁板、搁架及水盘，将 70% 酒精喷洒于布上，再进行腔体的清洁，培养箱内尽量避免死角的存在，擦拭腔体内每个位置，再将移除的配件擦拭清洁后，安装到位。

https://eppendorf.juplus.cn/eppendorf_single/#/channelTrack?id=117

（点击查看 有效提高清洁效率的 CO2 培养箱）

4、试剂分装还要贴标管理

细胞培养会用到各种试剂，比如培养基、血清和胰酶等，它们也可能发生污染并直接影响整个实验室的细胞。所以要从可靠的供应渠道购买试剂(提供分析证书)，所有分装使用或备用的试剂都应记录并标签标记。

（标签内容需包含：名称/日期/批次号）

标签管理对样品存量、使用情况及质量追溯具有重要意义，但日常使用中我们总会发现笔迹磨损、低温环境造成标签脱落的情况，注意不要再使用这些细胞样品或试剂，以免发生交叉污染。

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（点击查看 支持数字化信息管理的样品管）

5、污染细胞还要舍得丢

没有经过细胞污染的研究生涯是不完整的，很多细胞培养新手都问过这些问题：这是污染了吗？是什么污染？还有救吗？

小 E 作为过来人，明白大家实验室都条件有限，如果发生以上污染情况，首先要判断污染源，是培养基等试剂污染还是操作不当造成的？然后及时处理，如果培养基等试剂都没问题，则可以继续使用，如果有问题或无法判断，立即配置新的。用 PBS 润洗细胞换液后加入抗生素，之后再传 2-3 代。

小 E 始终认为，污染细胞最 佳处理方式还是：彻底消毒后丢进垃圾箱！

（心要狠手要稳，图源网络）

实验汪们都听说过差不多的故事，一个被遗忘在角落的培养皿把整个细胞实验室给污染了，我们的目标是杜绝这种惨剧！

养细胞是一件需要长时间细心与耐心的工作。就算是细胞培养老手，也会有翻车的风险。因此时时回顾一下污染风险和应对策略，会让实验汪们更好地完成细胞培养工作。

小 E 还有完整的细胞防污染白皮书，大家可以点击链接下载，时时回顾学习，减少细胞污染发生。小 E 祝大家顺利出结果，快速发文章！

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（点击查看 细胞防污染完整白皮书）

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