犬肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒实验注意事项及技术原理

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　　犬肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒实验注意事项及技术原理

　　犬肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒实验注意事项：

　　1.实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37 溶解;试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。

　　2.实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

　　常见问题以及解决方法：

　　1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻;

　　2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理;

　　3、洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动;

　　4、显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况;

　　5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒;

　　6、读板：读板的时候先应该保证板的清洁干净;

　　7、严格按照说明书操作。

　　技术原理：

　　(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

　　(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

　　(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

　　(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

　　(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

　　(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平)，并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

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