618液相柱经典应用 | 亲水色谱法分析无机离子和药物中的反离子

无机离子的分析是许多实验室的核心功能，由于高极性离子在非极性键合相保留特性较差，一般通过离子交换（IEX）和离子色谱（IC），分析时间长、对仪器的要求更高，一直是一个难题。

亲水相互作用色谱 Hilic

随着亲水相互作用色谱（HILIC）化学键合相的发展，高效分析各种高极性化合物成为可能。

与 IEX 和 IC 方法相比，HILIC 有几项独特的优势： 

可以在单次进样中同时分析阳离子、阴离子和极性中性化合物

采用标准的水-乙腈洗脱液，无需任何强酸或碱性添加剂

系统无需再生、抑 制器或洗脱液发生器

HILIC 可使用更高效的硅胶型基质取代聚合物树脂

除此之外，使用安捷伦王 牌产品，表面多孔填料 Agilent InfinityLab Poroshell 120，更可以可实现 UHPLC 低反压高效分离。

采用 Poroshell 120 Hilic 色谱柱

分析金属卤化物和无机离子

本应用采用表面多孔型 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 和 HILIC-OH5 2.7 µm。

实验部分

样品前处理

将无机离子作为盐进行分析，将其溶于水中，并单独进样无需进一步前处理。

流动相前处理

根据所需浓度称取甲酸铵，与水混合。然后用甲酸将洗脱液的 pH 调节至 3。HPLC 级乙腈直接使用，无需进一步前处理。

仪器

Agilent G4218A ELSD 的 Agilent 1260 二元液相色谱系统。

色谱条件

色谱柱

• Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 685775-924）

• Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 685775-601）

• Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 695775-901T）

仪器条件

选择性比较 

三种 InfinityLab Poroshell 120 HILIC 固定相对无机离子表现出差异极大的选择性。

图 1. Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z (A)、HILIC-OH5 (B) 和 HILIC (C) 色谱柱之间选择性的比较

果聚糖键合相的 Poroshell 120 HILIC-OH5 和两性离子键合相的 Poroshell 120 HILIC-Z 用于快速分离无机离子的 HILIC 方法，彼此表现出正交选择性。与硅胶型 HILIC 固定相相比，Poroshell 120 HILIC-Z 和 Poroshell 120 HILIC-OH5 使大多数离子（特别是阴离子）表现出显著改善的保留特性和分离度。

基于 HILIC 模式分析无机离子的案例，可拓展用于替代离子色谱柱，检测原料药中的反离子和其它无机离子。

案例

原料药硫酸核糖霉素中的反离子（硫酸根）检测

色谱柱

Agilent InfinityLab HILIC-Z 2.1 x 100 mm, 2.7 um

仪器系统

Agilent 1260 II –ELSD 检测器

Mobile Phase

A-100mM acetate; B-ACN

Gradient

0-1min, 65%B; 1-5min 65%B-55%B, stop time 10 min, post run: 3min

Flowrate

0.4ml/min

安捷伦 • 618

618 活动期间

2024 年 6 月 3 日 ~ 30 日

Agilent Poroshell 120 2.7um 

全线 6 折！