Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪使用重组试剂进行检测
目的
美国药典第<86>章允许使用非动物来源的试剂进行细菌内毒素检测,包括使用重组级联试剂(rCR,Recombinant Cascade Reagent)和重组C因子试剂(rFC,Recombinant Factor C)。本文展示了Sievers® Eclipse细菌内毒素(BET,Bacterial Endotoxins Testing)检测仪与rCR试剂在化验各种药品时的适用性和相容性,为鲎试剂(LAL,Limulus Amoebocyte Lysate)细菌内毒素检测提供了高效、非动物来源的替代方法。
我们对7种已发布的市售产品进行了方法适用性和优化分析。我们用Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪运行了一个批次的市售重组级联试剂(rCR),并对比了同一生产商的动态显色法鲎试剂。在本研究中测试的7种市售产品列于表1中。
表1:用Eclipse测试的产品
背景信息
Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪采用动态方法来分析标准曲线和最多21个带阳性对照(PPC,Positive Product Controls)的样品。Sievers Eclipse微孔板预置来自参考标准内毒素(RSE,Reference Standard Endotoxin)的标准品和阳性对照(PPC),用户仅需使用1 mL的鲎试剂即可运行每次最多5点的标准曲线(范围:50 – 0.005 EU/mL)的化验。
市售的rCR试剂与显色法试剂类似,具有LAL级联结构。本研究旨在确定这种rCR试剂在进行现实生活样品测试时的表现是否确实与传统的动态显色法鲎试剂相似。我们用Sievers Eclipse对每种产品分别使用rCR试剂和动态显色法试剂进行测试。
样品制备和实验测试计划
我们通过测试不同稀释倍数的细菌内毒素检查用水(LRW,LAL Reagent Water)来对全部产品进行初步筛选,以确定哪种稀释度可以实现最 佳PPC回收率和克服样品干扰。我们分析的稀释倍数包括1:1、1:10、1:20、1:50、1:100。表2是初步筛选出来的各种试剂类型的品名和稀释倍数。在测试产品时,我们对胰岛素、红霉素、氯化钾进行了多种稀释倍数的测试,以便在完成产品筛选后得到更多的结果并克服样品干扰。
标准品和产品的接受标准如下:
标准品、样品、阳性对照(PPC)的变异系数百分比(CV%):≤ 15%
PPC回收率:50-200%
R值:≥ -0.980的绝 对值
表2:产品的稀释倍数
测试结果
测试结果总结如下。表3和表4是标准曲线的结果,表5-10是样品的结果。
标准曲线结果
表3:动态显色法鲎试剂的5点标准曲线结果:使用Sievers Eclipse测试
表4:重组级联试剂的5点标准曲线结果:使用Sievers Eclipse测试
样品结果
氯化钾
表5:Sievers Eclipse测试的氯化钾液结果(每个板上有3或5份重复样品)
红霉素
表6:Sievers Eclipse测试的红霉素液结果(每个板上有3或5份重复样品)
*一个重复样品有分孔
**所有3个重复样品中都有分孔
***一个重复样品的%CV > 15
5%葡萄糖
表7:Sievers Eclipse测试的5%葡萄糖液结果(每个板上有3份重复样品)
0.9%氯化钠
表8:Sievers Eclipse测试的0.9%氯化钠液结果(每个板上有3份重复样品)
乳酸林格氏液
表9:Sievers Eclipse测试的乳酸林格氏液结果(每个板上有3份重复样品)
人胰岛素注射液
表10:Sievers Eclipse测试的人胰岛素注射液结果(连续编号的板上有3、5或6份重复样品)
*一个重复样品有分孔
注射用水
表11:Sievers Eclipse测试的注射用水结果(每个板上有3份重复样品)
结论和建议
对于本研究中的大多数现实生活样品类型来说,Sievers Eclipse与市售的重组级联试剂有极 佳的适用性和相容性。红霉素和胰岛素样品均有多个分孔,很可能是由于样品干扰。如果实验室考虑使用非动物来源的试剂进行符合USP <86>标准的细菌内毒素检测,则可以用Sievers Eclipse微孔板来优化rCR试剂。
为了便于以后分析,在比较rCR试剂和鲎试剂时,必须进行样品筛选以确定每种产品的最 佳稀释倍数。当有更多批次的市售试剂可用时,也应对其进行测试以确认结果的准确度和可重复性。
相关产品
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪使用重组试剂进行检测
- 我们对7种已发布的市售产品进行了方法适用性和优化分析。我们用Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪运行了一个批次的市售重组级联试剂(rCR),并对比了同一生产商的动态显色法鲎试剂。
-
- 告别传统内毒素检测方式,试试事半功倍的Eclipse细菌内毒素检测仪!
- Sievers® Eclipse®月食细菌内毒素检测可最多减少90%的鲎试剂使用量,是您在当前鲎试剂供应减少情况下的理想选择!
-
- 切换到更简单的细菌内毒素检测仪Sievers Eclipse的7个理由
- 众所周知,手动细菌内毒素检测耗时费力,容易出错,而且重测成本高昂。这些挑战表明,需要改变细菌内毒素检测流程并采用自动化。此外,还有机会大幅减少鲎试剂的使用和对自然资源的依赖。
-
- Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪与21 CFR Part 11合规性
- sievers Eclipse细菌内毒素检测仪的一个突出特点是软件直观。仪器软件带有分步提示,非常直观易用。
-
- 微流控自动化与Sievers Eclipse内毒素检测仪
- 微流控自动化带来了高通量、快速的检测设置、最少的手动时间和简单的培训。
-
- ANSI/AAMI ST72:2019法规概述及其与Sievers Eclipse月食细菌内毒素检测仪的关系
- Sievers Eclipse是完全合规的内毒素检测仪。
-
- 样品与鲎试剂的1:1比例:其重要性以及在Sievers Eclipse月食细菌内毒素检测仪上的确认过程
- 证明平台间生物化学过程的等效性。
-
- 减少鲎试剂使用与药典的变化趋势:在细菌内毒素检测中采用重组方法
- 对于制药业来说,在美国,科德角、特拉华州和切萨皮克湾以及南卡罗来纳州海岸线上的春季月夜对供应安全、清洁、可注射药物的能力至关重要。正是在这些夜晚,鲎来到海滩上产卵,这是每年数百万大西洋鲎进行的仪式。
-
- 微流控自动化与Eclipse细菌内毒素检测仪的常见问题解答
- 您关心的问题都在这里…
-
- 访Eclipse细菌内毒素检测仪全 球产品经理,您关心的话题都在这里
- Eclipse检测仪由一个微孔板、一台分析仪和企业软件组成,将先进的微流体、自动化和易用性结合在一起,大大提高了QC实验室的效率。Eclipse的核心是微孔板,这是一台精密制作的微流控液体处理设备
-
- 重磅:USP专家委员会批准Chapter< 86> 重组试剂检测细菌内毒素
- 重磅:USP专家委员会批准Chapter< 86> 重组试剂检测细菌内毒素
-
- 细菌内毒素检测平台的验证
- 验证,这个词在任何实验室中都会引起一系列感觉,可能是恐惧感或不安感,因为验证过程可能既费时又耗力。也可能引起兴奋的感觉,因为实验室中正引入一台新仪器。无论何种感觉,验证新平台都是一项艰巨的任务。
-
- 减少内毒素合规检测中鲎试剂的使用
- 验证数据表明,Eclipse与96孔板读取器的性能相当,同时可最高减少90%的鲎试剂使用量。
-
- 内毒素检测的思考 - 采用药典方法同时减少鲎试剂的使用
- Sievers Eclipse内毒素检测仪,助您在符合药典法规的同时减少鲎试剂的使用。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
最新话题
最新资讯
- 2025罗氏诊断分子诊断原料研讨会圆满落幕
- 肇庆焕发生物科技有限公司采购佳航全自动熔点仪Digipol-M70
- 雨水 | 求知正当时,快来领取高博会“学术大礼包”!
- Lake Shore低温探针台助力一篇Nature子刊!锡基钙钛矿铁电半导体研究取得重要进展
- 成果突破!高分辨化学成像显微镜,助力组织内微塑料与植物化学成像研究取得重要进展!
- Titank C18-Plus发布
- 会议邀请 | 2025制药行业质量控制技术大会暨展览会(合肥站)
- 北京四环起航:专业赋能开新局,团结奋进谱新篇
- 镁伽科技亮相苏州市“人工智能+”创新发展推进大会,展示创新成果并获省级殊荣
- 智汇太湖丨第45届无锡太湖国际机床及智能工业装备产业博览会即将启幕
作者榜
参与评论
登录后参与评论