山东市监局发布《伪狂犬病净化技术规范 荧光RT-PCR检测法》

      伪狂犬病净化

　　伪狂犬病是由疱疹病毒科疱疹病毒Ⅰ型伪狂犬病毒引起多种家畜和野生动物的传染病。采取一系列措施，达到消灭和清除猪伪狂犬病的过程。根据猪伪狂犬病的监测结果，淘汰感家畜，使种家畜中伪狂犬病逐渐被清除的疫病控制方法。

　　规范性引用文件

　　《GB/T 35911　伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法》等

　　检测耗材：

　　1、mL离心管; 2、0.2 mLPCR薄壁管; 3、酶标板,移液器吸头。

　　检测仪器：

　　1、荧光PCR检测仪;               2、PCR仪和凝胶成像系统;

　　3、高速台式冷冻离心机;        4、组织研磨器或者研钵;

　　5、微量移液器;   6、酶标仪;  7、恒温箱;   8、高压灭菌锅。

　　检测试剂：

　　1、无水乙醇，-20 ℃预冷。

　　2、75 %乙醇，无水乙醇和双蒸水配制，-20 ℃预冷。

　　3、含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10 mmol/L，-20 ℃保存，避免反复冻融。

　　4、普通PCR引物参照GB/T 18641。

　　5、荧光PCR引物和探针参照GB/T 35911。

　　6、酶标检测试剂 等效采用PRV-gE基因缺失疫苗配套的商品化鉴别检测试剂。

　　采样技术:

　　前腔静脉或扁桃体采样，并及时对血样或组织样品规范保存、送检。采血过程及制样过程要防止污染并规范标记。

　　检测评估:

　　免疫后3W检测gB抗体和gE抗体。当gE抗体阴性时，如果90 %的样品gB抗体阳性，即可认为群体免疫合格。

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