ELISA的概念、原理、操作步骤

来源：内容来源于网络浏览量：1179次

【导读】 ELISA的概念、原理、操作步骤 ELISA是酶联接免疫吸附剂测定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技...

ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。

（一）　原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。（二）　操作步骤方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃**。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

2004-07-23 16:27:07

标签：

收藏(0) 赞(0) 踩(0)

随时了解更多仪器资讯，求购、招标、中标信息实时更新，厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网（yiqi.com）。扫一扫关注仪器网官方微信，随时随地查看仪器用户采购、招标需求！

您可能感兴趣

ELISA的概念、原理、试剂、操作步骤以及注意事项2004-07-12 15:05:27

ELISA的概念、原理、试剂、操作步骤以及注意事项
nstant ELISA 实验步骤2004-07-12 15:05:27

nstant ELISA 实验步骤
大鼠脂联素（ADP）elisa实验步骤2004-07-13 09:31:27

大鼠脂联素（ADP）elisa实验步骤本试剂盒仅供研究使用。检测范围：
Elisa实验步骤：兔蛋白激酶A（PKA）elisa试剂盒2004-07-16 10:28:52

Elisa实验步骤：兔蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应
ELISA实验基本原理2007-05-24 13:46:39

ELISA实验基本原理基本原理　　1971年Engvall和Perlmann发表了酶
ELISA试剂盒步骤严格控制操作时间2004-07-23 16:27:07

操作步骤虽然ELISA试剂盒实验过程操作点的许多需要掌握操作步骤。如果稍有不慎，操作不合
ELISA加样步骤中的五个技巧2004-07-25 09:29:06

我公司长期代理ELISA检测试剂盒，而它在使用的过程中有着多种步骤，每一步都需要特别细心与认真对待
电火花检测仪的原理以及操作的时候要注意什么呢？2004-08-07 09:10:55

　　一、电火花检测仪原理　　电火花检测仪原理-金属表面绝缘防腐层过薄、漏金属及漏电微孔处的电阻值和气隙密度
防冻液冰点测试仪原理可靠操作方便2004-08-08 18:04:02

防冻液冰点测试仪是测量防冻液冰点的精密光学仪器。其基本原理是应用全反射临界角法测量溶液的折射率，进而标定出所
盐雾试验箱试验原理及其操作2004-08-18 09:23:05

盐雾试验箱试验原理盐雾试验箱可以做的试验有四种:中性盐雾试验(NSS)、铜加速乙酸盐雾试验(CASS)、交变

版权与免责声明

①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。

②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。

③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。

④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi