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- 【导读】过量饮酒已经成为世界公共卫生的主要问题,目前我国对饮酒量检测主要通过检测血液中的乙醇浓度。血液中乙醇浓度的测定有化学法、传感器法、酶法和气相色谱法等,其中气相色谱法是目前使用较普遍...
过量饮酒已经成为世界公共卫生的主要问题,目前我国对饮酒量检测主要通过检测血液中的乙醇浓度。
血液中乙醇浓度的测定有化学法、传感器法、酶法和气相色谱法等,其中气相色谱法是目前使用较普遍的方法。本文利用乙醇的易挥发性,以叔丁醇为内标,用顶空自动进样气相色谱,火焰离子化检测器进行检测,建立的方法样品用量少,操作简便,准确度高,能对血液中的乙醇进行可靠分析。
1设备
气相色谱仪:天津兰博GC6500气相色谱仪,配FID检测器,顶空自动进样器。
2 试剂
乙醇,叔丁醇均为色谱纯。
3 分析步骤
3.1 标准曲线的绘制
用移液枪分别取0.10 ml配制成不同浓度的乙醇标准溶液(0.10 mg/ml、0.20 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、3.00 mg/ml)加入预先加有0.50 ml叔丁醇内标工作液(浓度为0.04 mg/ml)的顶空自动进样器样品瓶内,用封盖器盖上带有硅橡胶垫的顶空钳口盖,混匀,置于顶空自动进样器中加热后测定。以乙醇浓度为横坐标,乙醇对叔丁醇的峰面积比为纵坐标,绘制标准曲线。
3.2 样品分析
用移液枪移取0.10 mL待测血液样品于预先加有0.50 ml叔丁醇内标工作液(浓度为 0.04 mg/ml)的顶空自动进样器样品瓶内,用封盖器盖上带有硅橡胶垫的顶空钳口盖,混匀,置于顶空自动进样器中加热后测定。
3.3色谱条件
色谱柱:GDX-102(60目~80目)填充色谱柱(2 m × 3 mm);
载气:高纯氮气,流速20.0 ml/min;
氢气:30 ml/min;空气:300 ml/min;尾吹气:28 ml/min;
进样器温度:150℃;检测器温度:250℃;
柱温:70℃;
进样量:1.0 ml,分流比:5:1;
顶空条件:样品瓶温度70℃,平衡时间15 min,进样阀温度:105℃,管路温度110℃。
3.4结果与讨论
在规定的色谱条件下进样,以乙醇浓度为横坐标,对应的峰面积为纵坐标,绘制工作曲线。建立的标准曲线为y=1.7092x+0.0468,r=0.998。标准品色谱图如图1所示。
图1 乙醇和叔丁醇色谱图空白血中分别加入不同量的乙醇后制成不同浓度的三份样品,以上面的条件每份样品重复测定6次,平均回收率在97.8% ~104.3%之间,RSD在2.0%以下,结果见表1。
表1 回收率与精密度试验结果(n=6)样品加标值(mg/ml)测定平均值(mg/ml)平均回收率(%)RSD(%)10.730.74101.31.520.930.9197.81.131.441.4298.60.94结论
本文建立的自动顶空气相色谱法测定血液中的乙醇方法,操作简便,准确度高,能满足血液中乙醇含量的检验要求,自动化程度高,分析时间短,适合批量样品检验需求。
- 2004-07-26 09:12:06
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