- 交错人字形混合器芯片制备空间稳定的脂质体:脂质组分和PEG脂质含量的影响
- 助力石油天然气行业规范化!《岩样核磁共振参数实验室测量规范》正式发布启用
- 产品推荐 | 反射多模光纤QR系列
- 公司团建,共创美好未来;团队携手,共筑辉煌明天(日照篇)
- 【摄影大赛】五一劳动节·群星闪耀时!
- 纽迈分析祝大家劳动节快乐!
- 科尔康祝您五一国际劳动节快乐!
- 以奋斗人为本 | 福立仪器向每位劳动者致敬,祝大家劳动节快乐!
- 【客户焦点】帕维亚大学探索血小板生产的生物打印之路
- NEW Webinar气候智能农业:推进作物胁迫表型研究以提高作物抗逆性
- 产品推荐 | RMS3000微型拉曼光谱仪
- 文献分享 | 快速鉴别肠炎沙门氏菌的四种血清型: 大拉曼和手持式拉曼光谱仪的性能对比
- 应用案例 | 负载型金属簇异质结构对偶氮加氢催化的表面电荷效应
- 来源:内容来源于网络 浏览量:2784次
- 【导读】摘要: 考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结...
摘要:
考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。
1. 实验部分
1.1 仪器与试剂:Labtech UV POWER紫外分光光度计;玻璃比色皿一套;考马斯亮蓝G250;
牛血清蛋白;超纯水。
1.2 试液的制备:
牛血清蛋白标准溶液(1000ug/ml)的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加入超纯水溶解并定容。
考马斯亮兰G250试剂 称取100mg考马斯亮兰G250,溶于50ml95%的乙醇后,加入120ml85%的磷酸,用水稀释至1升。
2. 结果与讨论
2.1 校正曲线的绘制
准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml分别加入到6只10ml试管中,然后用超纯水补充到0.1ml,各试管分别加入5ml考马斯亮兰G250试剂,混合均匀后,即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度
为横坐标,吸光度为纵坐标绘制校正曲线如下图,校正曲线方程为A=0.613556C+0.001008,R=0.9994。
2.2 精密度
配制0.6mg/ml牛血清蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次,得到吸光度的相对标准偏差。
表1 精密度测定结果
次数
1
2
3
4
5
6
RSD%
A
0.2626
0.2622
0.2620
0.2628
0.2629
0.2626
0.13
2.3 稳定性
取1mg/ml牛血清蛋白标准溶液每十分钟测定一次,50分钟内的吸光度变化如下表2。
表2 稳定度测定结果
时间(min)
A1
A2
A3
A平均
0
0.5511
0.5523
0.5516
0.5517
10
0.5204
0.5184
0.5168
0.5185
20
0.4910
0.4901
0.4903
0.4905
30
0.4765
0.4716
0.4721
0.4734
40
0.4524
0.4475
0.4440
0.4480
50
0.3982
0.3935
0.4031
0.3983
3. 结论该方法测定快速、简便,干扰物少,是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。v
- 2004-07-09 09:55:21
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
- 随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
小量组织的蛋白质组及磷酸化蛋白质组定量分析2004-07-05 09:14:03
在这篇工作中,我们采用内标掺入 SILAC 的定量方法对大鼠胰岛进行了蛋白质组以及磷酸化蛋白质组的定量研
-
基于二氧化钛富集策略的人类磷酸化蛋白质组大规模鉴定2004-07-05 09:14:03
在这部分工作中,我们采用了高 pH 反相色谱结合二氧化钛富集以及二氧化钛富集结合强阳离子交换分级两条技术
-
核酸-蛋白质互作的研究方法简介2004-07-12 15:05:27
核酸-蛋白质互作的研究方法简介
-
怎么样提取细胞中的总蛋白质?2004-07-14 10:19:49
最常用的是:用细胞裂解液提取呀,最后你是要做含量测定还是啥的?含量测定酶标仪或紫外光度计。具体的方
-
美科学家成功开发基于液相色谱的蛋白质检测分析平台-诺顶仪器提供参考2004-07-14 10:19:49
美科学家成功开发基于液相色谱的蛋白质检测分析平台 癌症早期检测更快更灵敏一种基于新的蛋白质检测分析
-
蛋白质定量——Bradford法与Bradford斑点法2004-07-19 09:04:13
Bradford法 该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定
-
植物组织蛋白质提取的方法2004-07-23 16:27:07
蛋白质是一种复杂的有机化合物,旧称“朊"。蛋白质是由氨基酸分子呈线性排列所形成,相邻氨基酸残基
-
影响蛋白质盐分析分离的5个因素2004-07-23 16:27:07
我们从食物摄取的蛋白质,在胃液中的胃蛋白酶和胰液中的胰蛋白酶作用下,经水解反应,生成氨基酸。氨基酸
-
蛋白质生理功能说明2004-07-23 16:27:07
蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命
-
正白氨酸对蛋白质代谢起主要调节作用2004-07-25 09:29:06
在三种支链氨基酸中,对蛋白质代谢起主要调节作用的是正白氨酸,异亮氨酸撷氨酸对蛋白质的合成和降解无
紫外分光光度法测定蛋白质含量 1.1 仪器与试剂:
-
您可能感兴趣
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi