资源编号:BNCC338008
英文名: HSF
类型: 贴壁生长
形态: CM1-1培养液中,贴壁,成纤维细胞样,中间凸起,两端细长;
分离基物: 成年人,皮肤(增生性瘢痕)
提供形式: 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级: 1
培养方法
| 传代方法 | 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养 |
| 生长条件 | 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 |
| 生长特性 | 细胞在低密度时呈纤维状细胞,有中间凸起,两端细长的,也有像神经元细胞的。在高密度时,细胞会连成一片,细胞间隙不明显。 |
| 存储条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜移至液氮中保存。 |
HSF 人皮肤成纤维细胞
贴壁,成纤维细胞样
编号: 338008
培养:37℃,5%CO2 DMEM 培养液
产品形式: 2mL 冻存管 × 2支、或 T25 × 1瓶
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
复苏步骤:
①新制 100mm 平皿 1个,含 12mL 上述培养液;
②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;
④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,5-7 天长满。
传代/冻存:将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 2mL(/100mm 皿/T25 瓶)胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),在显微镜下观察, 期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 1min 取出。
①传代: 6mL 培养液终止消 化,轻轻吹打均匀细胞,后可 1:2 传代;
②冻存: 3mL 冻存液(50%基础培养基+40%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为 3支冻 存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
| 项目 | 质量标准 | 复苏记录 |
| 复活性 | 18h贴壁,144h长满 80% | 过夜 18h观察贴壁,130h密度达 80% |
| 细胞形态 | 贴壁,成纤维细胞样 | 贴壁,成纤维细胞样,长梭形 |
| 附图 | ![]() | ![]() |
| 结论 | 复活性好,且细胞形态无异常,合格 | |
质检员/日期: 朱玥 2021.05.27 审核员签字:丁保敏
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