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人脑胶质瘤细胞

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详细介绍

资源编号:BNCC302929

英文名: T98G

类型: 贴壁生长

形态: CM8-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,短梭形

分离基物: 人脑

提供形式: 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。

安全等级: 1

应用领域: This cell line is a suitable transfection host.

培养方法

培养基 .
传代方法 Volumes used in this protocol are for 75 cm2 flasks; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. Remove and discard culture medium. Briefly rinse the cell layer with Ca++/Mg++ free Dulbecco's phosphate-buffered saline (D-PBS) or 0.25% (w/v) Trypsin - 0.53 mM EDTA solution to remove all traces of serum which contains trypsin inhibitor. Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes). Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal. Add 2.0 to 3.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting Resuspend the cell pellet in fresh growth medium. Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels. Incubate cultures at 37°C.
Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:3 to 1:10 is recommended
Medium Renewal: 2 to 3 times per week
生长条件 37℃,5%CO2,CM8-1培养液。CM8-1培养液:90%EMEM+10%FBS。EMEM:EMEM培养液。
存储条件 liquid nitrogen vapor phase;Freeze medium: Complete growth medium 95%; DMSO, 5%
Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

T98G 人脑胶质瘤细胞

贴壁,上皮细胞样

编号: 302929

培养:37℃,5%CO2 CM8-1 培养液

产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ;

安全等级: 一级,安全柜或超净台操作

收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。

培养条件:37℃,5%CO2,CM8-1 培养液。CM8-1 培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培养基,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。

复苏步骤

①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;

②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;

③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,6-8 天长满。

传代/冻存:将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 2mL(/100mm 皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落 时,则吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 4.5min 取出。传代用 6mL CM8-1 培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后 可分 3~6 皿培养;冻存则用 3mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为 6 支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:

项目 质量标准 复苏记录
复活性: 18h 贴壁,164h 长满 80% 过夜 18h 后观察贴壁,164h 密度达 80%
细胞形态: 贴壁,上皮细胞样 CM8-1 培养液中,贴壁,上皮细胞样,多角形
附图:
 结论: 复活性好,且细胞形态无异常,合格  

质检员/日期: 李璐 2020.04.10 审核员签字:苏丹

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