RNAdvance Tissue - 组织总 RNA 提取与纯化试剂盒

应用：从组织提取总 RNA

下游应用技术： qRT-PCR，微阵列分析

过程概述

手工操作过程：A. 将组织放入裂解液中 B. 匀浆及 蛋白酶 消化。

自动化或继续手工操作过程：

1. 加入结合缓冲液

2. 分离磁珠，去上清液，用乙醇清洗

3. DNase I消化（可选）

4. 加入重新结合缓冲液（仅适用于进行可选 Dnase 步骤时）

5. 分离磁珠，去上清液，用乙醇清洗

6. 洗脱

高得率

使用 RNAdvance Tissue 方法分离总 RNA，产量高，无需离心、真空抽滤或使用有机溶剂。使用 RNAdvance Tissue 从 10 mg 大鼠肝组织分离 RNA，产量比 RNeasy* 方法高 三倍，比 MagMax* 方法高 两倍（图 1）。如图 2 所示，RNAdvance Tissue 体系提取的 RNA 的 Ct 值更低，显示 RNA 的起始量增加。

图 1. RNAdvance Tissue 体系与同类试剂盒比较，以多孔板形式提取 10 mg 大鼠肝组织，每种试剂盒 N = 24。

图 2使用  RNAdvance 和同类 RNA 提取试剂盒处理等量大鼠肝组织，每种 8 个重复。使用 Invitrogen First Strand Synthesis 试剂盒进行 RT 反应，用量与各试剂盒相等。在 ABI Prism* 7900 上使用 Applied Biosystems TaqMan Universal PCR Master Mix* 进行 qPCR 反应。引物和探针旨在扩增大鼠的 β-肌动蛋白基因。

各种组织类型

分离总 RNA 的能力在各种组织类型间有很大差别，这是由许多因素导致的，包括 RNases 的内切水平差异和某些组织的纤维或富含脂质的属性。RNAdvance Tissue 可很好的适应各种组织样品。图 3 显示了来自 5 个不同组织类型（包括纤维组织和多脂组织）提取的 RNA 产量。

图 3. 在 Biomek NX Span-8 上使用 RNAdvance Tissue 体系从多个不同大鼠组织提取总 RNA。产量以 µg/mg 组织为单位。 肝组织 N = 24，所有其他组织 N = 8。