Qubit™ 3荧光定量仪 套装 Q33218

Qubit®荧光定量仪的工作原理

Qubit®荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时（图1）。Qubit®3.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。以往的紫光吸光法不具选择性，测量260nm所有分子的吸光值——包含DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸或多余的盐离子。此外，紫外分光光度计的灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量（图2）。使用Qubit®荧光定量仪，将大大提升您研究的准确性。因为Qubit®分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA,RNA或蛋白，避免不准确测量带来的重复工作。

图1. Qubit® dsDNA HS 分析试剂盒的性能. The Quant-iT® dsDNA HS Assay具有0.2–100 ng线性定量范围，在样品中有同等量的RNA时选择性的结合dsDNA。

图2. Qubit®定量检测平台的精确度和准确性。将浓度范围从0.01到10ng/uL的10份lambda DNA，在Qubit®荧光定量仪上使用Quant-iT® dsDNA HS分析试剂盒按说明书操作进行检测。相同的10份lambda DNA样品采用NanoDrop® ND-1000分光光度计进行分析，将这种检测方法结果的准确性和精确度进行比较。每一个柱代表10份样品的平均值。误差线代表10个样品的标准差。列出的浓度为加入Qubit®分析管之前的起始样品中的DNA浓度。

Qubit®3采用更具人性化的界面，快速简单地获得实验结果。大尺寸的彩色触摸屏和Android系统，使得操作非常简单直观。浓度计算和设置都由仪器自动完成（图3）。Qubit®最多可储存1000个样品结果，您可以通过U盘导出，也可以使用USB连接线直接与电脑相连。此外，在样品的延伸范围或超过试剂盒的检测范围，屏幕上均会有图形显示（图4）。

图4.Qubit®3.0荧光定量仪的标准曲线，显示样品浓度是处于延伸范围（extended range）或超出范围（不显示）

适用于Qubit®荧光定量仪的试剂盒

Qubit®试剂盒均采用相同的操作方案，只是孵育和读数稍有差异。其中DNA和RNA分析试剂盒仅需孵育2分钟，而蛋白分析试剂盒需要15分钟（图5）。Qubit®3.0荧光定量仪自动保存您的数据，您可以用USB数据线或U盘导出。除了常规的 dsDNA，oligos，总RNA，microRNA和蛋白质的分析试剂盒，在Ion Personal Genome Machine® (PGM™) 测序仪上进行测序之前，可以使用专门的Ion Sphere™ Quality Control Kit在Qubit®3.0上进行Ion Sphere™ 颗粒质量评估。

• 了解Qubit® 分析试剂盒

图5. Qubit®定量试剂盒操作流程. 与Qubit® 3.0荧光定量仪配套使用，Qubit®定量试剂盒提供无缝工作流程和简单的数据读取。每一个Qubit® 分析试剂盒提供浓缩的分析试剂，稀释缓冲液和预稀释的标准品。先用提供的缓冲液稀释试剂，加入样品（1-20uL之间的任何体积），读取Qubit® 3.0定量仪上的浓度即可。这些试剂盒均在常温进行操作，信号稳定时间长达3小时。

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