大环抗生素型大环抗生素型手性色谱柱是最近发展起来的，通过将大环抗生素键合到胶上制成的新型手性色谱柱。大环抗生素型手性色谱柱的出现归功于Dan Armstron 的贡献。此类色谱柱常用的大环抗生素主要由三种：利福霉素（Rifamycin），万古霉素（Vancomycin），替考拉宁（Ticoplanin）。利福霉素作为手性添加剂在毛细管电泳分离手性化合物方面得到了成功运用。万古霉素和替考拉宁分子结构中存在“杯”状结构区和糖“平面” 结构区。此类色谱柱性质稳定，可用于多种分离模式。手性分离基于氢键、π-π作用、形成包合物、离子作用和肽键等。