细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里，但是没有立刻放-80……

kaiko7 2012-12-08 冻存管浏览 622 次

细胞放在冻存管里然后放程序降温盒里（之前一直放4度的），但是没有立刻放-80……室温下呆了2小时，会有事儿吗？用8%的DMSO冻的。
我脑子进水了。。。还求各位大大讲讲经验

精彩问答

蟑螂小飞飞发布日期：2014-07-14

会有些影响，在活率方面。70%的细胞应该没问题。
1）传统方法: 冻存管置于4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h
(或隔夜)--->液氮中长期储存。
注意：-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
（2）程序降温：利用已设定程序的程序降温仪以-1～-3℃/min的速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮中长期储存。

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595023023 发布日期：2012-12-09

323232325飞

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zhangxuezhi197 发布日期：2012-12-09

没事只要不染菌

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ztkenqq 发布日期：2012-12-10

没事啊，正常步骤就应该4摄氏度2h，-20摄氏度2h，-80摄氏度2h，然后放液氮罐。

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