我要发布
仪器网/ 仪器社区/ 支原体检测试剂盒/ 细胞支原体感染 检测试剂盒 怎么检测

细胞支原体感染 检测试剂盒 怎么检测

逃兵那点英雄气    2016-07-04    支原体检测试剂盒    浏览 452 次

精彩问答
五五1参 发布日期:2016-07-05
支原体检测试剂盒操作步骤:贴壁细胞:1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2×104。同时,接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。2.5天后,先吸去培养液,再加入1ml的固定液,静置20min,3.吸去固定液,晾干。4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15-20min或室温静置20~30min。5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入一滴封片液,并以盖玻片覆盖。6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。悬浮细胞:1.收集需检测的细胞,1500rpm,5min。2.将收集的细胞涂片于载玻片上,再加1ml的固定液,静置20min。3.吸去固定液,晾干。4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15~20min或室温静置20~30min。5.吸去Hoechst 33258工作液,用无菌水洗涤玻片3次,直接风干。风干后加入一滴封固液,并以盖玻片覆盖。6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。结果判断(参考):阴性:仅见细胞的细胞核呈现黄绿色荧光。阳性:除细胞外,细胞周围可见大量的大小均一的荧光着色颗粒。注意事项:Hoechst工作液对人体有害,请注意防护。固定液有刺激性气味,建议在通风橱进行固定。支原体检测时,Z好用不含抗生素的培养液培养2~3代,这样容易避免假阴性结果。检测支原体污染,可以使用支原体GXVero细胞,这样可以提高检测灵敏度,即将被检测样品接种于Vero细胞进行检测。
最新主题
相关版块
我要评论
X您尚未登录
账号登录
X您尚未登录
手机动态密码登录
X您尚未登录
扫码登录
官方微信

仪器网微信服务号

扫码获取最新信息


仪器网官方订阅号

扫码获取最新信息

在线客服

咨询客服

在线客服
工作日:  9:00-18:00
联系客服 企业专属客服
电话客服:  400-822-6768
工作日:  9:00-18:00
订阅商机

仪采招微信公众号

采购信息一键获取海量商机轻松掌控