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我提取海底沉积物细菌基因组DNA,但是很多沉淀(像盐),为什么?

XGTDSGsE333    2007-12-05    细菌核酸提取    浏览 498 次

用的是直接法提取,SDS裂解,酚氯仿抽提法提取,出现有颜色的沉淀,不知道是哪个环节出现问题了。怎么才能比较纯的提取细菌总DNA?谢谢!!!提取出来的东西,用1%胶可以跑出大约20kb的... 用的是直接法提取,SDS裂解,酚氯仿抽提法提取,出现有颜色的沉淀,不知道是哪个环节出现问题了。怎么才能比较纯的提取细菌总DNA?谢谢!!!
提取出来的东西,用1%胶可以跑出大约20kb的带来。但是扩pcr却出不来带。
我查了文章,他们提的片段也是20KB左右啊,我想可能是酚提取时没有提纯,我Z近再做一次试试,多些大家的帮助了啊!!

精彩问答
lqqqianqi 发布日期:2007-12-06
提取出来后可以重复操作几遍,以便尽量出去杂蛋白。做过植物的,也是有颜色,不过作为模板可以。你提取出来了还能跑出带来,应该能作为模板。pcr不成功有很多原因,可能是酶的原因,反应体系中各个试剂都可能影响,另外你的实验环境,是否无菌等等,都会影响你pcr的结果。另外你的是20kb,是不是小点了
全部评论
私人专属辰 发布日期:2007-12-06
YZ了酶对核酸的作用没?
潜新儿 发布日期:2007-12-06
该方法一般用于外周血的DNA粗提取,对原核生物可能并不适用(只做过人DNA的提取,不是很了解细菌)
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