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hc4560    2009-03-22    DNA测序仪/基因检测仪    浏览 469 次

The amplification was carried out on a PTC-200 thermocycler (MJ Research) in a 30m l reaction mixture containing10mM Tris–HCl (pH 8.3), 1.5mM MgCl2, 50mM KCl,150mM of each dNTP, 0.3mM of each primer (synthesized by TaKaRa), 1.0m l (about 1... The amplification was carried out on a PTC-200 thermocycler (MJ Research) in a 30m l reaction mixture containing10mM Tris–HCl (pH 8.3), 1.5mM MgCl2, 50mM KCl,150mM of each dNTP, 0.3mM of each primer (synthesized by TaKaRa), 1.0m l (about 100 ng) template DNA, and 1U Taq DNA polymerase (Promega). The reaction mixtures were denatured at 95 °C for 5 min and subjected to 30 cycles of 40 s at 95 °C, 1 min at 55 °C, 1.5 min at 72 °C, and a final extension step of 7 min at 72 °C. Amplified products were purified using WizardTM PCR Prep DNA Kit (Promega) according to the manufacturer’s instructions, then the two strands were sequenced
directly with PRISMTM BigDye Terminator Ready Reaction Kit (Applied Biosystems) on an ABI 310 Genetic Analyzer (Perkin Elmer).

精彩问答
稳稳雯雯98 发布日期:2009-03-23
扩增进行了一个PTC公司- 200 thermocycler (仪)在3000万升反应混合物containing10mM三盐酸( pH值8.3 ) , 1.5氯化镁,氯化钾50毫米, 150毫米的每个核苷酸,每个引物0.3 (合成试剂盒) ,一点○毫升(约100毫微克)模板DNA ,和1U Taq DNA聚合酶(盒) 。反应混合物的变性为95 ° C的5分钟和30日遭受周期为40时的95 ℃ , 1分钟在55 ℃ , 1.5分钟, 72 ℃ ,Z后一次延长步骤7分钟, 72 °角扩增产物纯化使用WizardTM PCR技术制备的DNA包(盒)根据制造商的指示,那么两个方向测序
直接与PRISMTM BigDye终结者就绪反应试剂盒(美国应用生物系统公司)的公司ABI 310遗传分析仪(珀金埃尔默) 。

扩增进行了一个PTC公司- 200 thermocycler (仪)在3000万升反应混合物containing10mM三盐酸( pH值8.3 ) , 1.5氯化镁,氯化钾50毫米, 150毫米的每个核苷酸,每个引物0.3 (合成试剂盒) ,一点○毫升(约100毫微克)模板DNA ,和1U Taq DNA聚合酶(盒) 。反应混合物的变性为95 ° C的5分钟和30日遭受周期为40时的95 ℃ , 1分钟在55 ℃ , 1.5分钟, 72 ℃ ,Z后一次延长步骤7分钟, 72 °角扩增产物纯化使用WizardTM PCR技术制备的DNA包(盒)根据制造商的指示,那麼两个方向测序
直接与PRISMTM BigDye终结者就绪反应试剂盒(美国应用生物系统公司)的公司ABI 310遗传分析仪(珀金埃尔默) 。
全部评论
白巧克力0603 发布日期:2009-03-23
扩增进行了一个PTC公司- 200 thermocycler (仪)在3000万升反应混合物containing10mM三盐酸( pH值8.3 ) , 1.5氯化镁,氯化钾50毫米, 150毫米的每个核苷酸,每个引物0.3 (合成试剂盒) ,一点○毫升(约100毫微克)模板D
一龙太二 发布日期:2009-03-23
放大了一个PTC-200 thermocycler(乔丹)的研究containing10mM Tris-HCl 3000 l反应混合物(pH 8.3),1.5mM MgCl2追施50毫米,150毫米,每dNTP底漆,0.3mM合成的),(我1.0m l(大约100名ng)模板的DNA,1U Taq DNA聚合酶(Promega)。这个反应混合物还变性在95℃5分钟,受到30周期的40秒,95°C,1分钟55°C,15分钟后72°C,Z后7分钟延长步72°C。产品已被使用WizardTM放大DNA组件(Promega PCR预科)按照制造商的说明,这两股进行排序
直接与PRISMTM BigDye终结者准备反应包(应用生物系统)在一个ABI 310遗传分析仪(莫)。
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