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1 农杆菌介导玉米转基因的影响因素研究 全文快照 白云凤 王国英... ZG生态农业学报-2006年3期
2 农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究 全文快照 袁鹰 李启云... 分子植物育种-2006年2期
3 农杆菌介导玉米遗传转化体系的研究进展 刘丽霞 李德全 生物技术通报-2005年6期
4 影响农杆菌介导玉米愈伤组织遗传转化因素的研究 农友业 何勇强... 广西植物-2005年2期
5 根癌农杆菌介导玉米遗传转化的研究进展 高武军 卢龙斗... ZG农学通报-2004年6期
6 影响农杆菌介导玉米优良自交系遗传转化的因素 黄雪清 卫志明 实验生物学报-2004年5期
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农杆菌介导玉米转基因的影响因素研究白云凤 王国英 苟明月 赵晋锋 董志刚ZG农业大学农业生物技术国家实验室，北京100094摘 要:研究了农杆菌介导玉米转基因过程中涉及的外植体选择、高渗和农杆菌共培养、选择培养基筛选转化体等因素对愈伤组织生长及转化效率的影响。结果表明，同一基因型玉米自交系中有少数幼穗幼胚诱导出的愈伤组织生长速度快，转化效率高；高渗和农杆菌共培养以及除草剂筛选YZ愈伤组织的生长，致使部分转基因愈伤不能分化成苗，并提出其解决途径。[著者文摘]
关键词:玉米转基因 农杆菌介导 除草剂 转化效率
分类号: S511 S513[机标]文献标识码：文章编号：栏目信息：
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Influencing factors on maize transgene process mediated by AgrobacteriumBAI Yun-Feng， WANG Guo-Ying， GOU Ming-Yue， ZHAO Jin-Feng， DONG Zhi-Gang State Key Laboratory for Agrobiotechnology， China Agricultural University， Beijing 100094， ChinaAbstract:The effects of explant selection， high osmotic treatment， co-culture with Agrobacterium， screening of transformed plants by selecting medium on the callus growth and transformation efficiency were studied in the process of maize transformation mediated by Agrobacterium. The results show that the growth rate and transformation efficiency of immature embryos derived from a vigorous ear are higher than those from other ears. High osmotic treatment and co-culture with Agrobacteriurn and herbicide screening impede the callus growth. The solutions are put forward.[著者文摘]
ation efficiency (Received Oct．15，2004；revised Dec．30，2004) 转基因技术使我们能有效利用外源基因进行品种改良、创造突破性种质。农杆菌介导的基因转化法具有能转移较大的DNA片段、整合的外源基因重排少且多以单或寡拷贝整合l1l2 J等优点。近年来该方法在禾谷类，诸如高粱[ 、水稻[ 、玉米[ 、小麦[ ]等作物的转基因中得到了广泛应用。农杆菌介导的转基因涉及外植体选择、外植体高渗和农杆菌共培养、愈伤组织在筛选培养基上培养以及筛选转化体等步骤，其中有关每一步涉及的因素对愈伤组织生长和转化的影响程度的报道尚不多见。本实验初步探讨了农杆菌介导玉米转基因过程中的一些影响因素，结果报道如下。1 实验材料与方法供试材料为玉米自交系“综31”，农杆菌菌株LBA4404，携带质粒pBar(含标记基因bar)或pBarF(不含标记基因bar)，均由ZG农业大学农业生物技术国家实验室保存。基本培养基为D培养基。
Key words:Maize transgene， Agrobacterium， Herbicide， Transformation efficiency
农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究袁鹰[1] 李启云[1] 郝文媛[1] 谭化[1] 孔祥梅[1] 张光弟[2] 刘德璞[1][1]吉林省农业科学院生物技术研究ZX，公主岭136100 [2]吉林省梨树县农业技术推广站，四平136500摘 要:以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美围杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体，利用农杆菌介导法转化Bt（CrylA．）基因，研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂（Basta）抗性筛选结果评估转化率，表明继代培养3-5d的愈伤组织适于转化，其中以继代5d的7922愈伤组织转化率Z高，为46．6％；不同基因型对农杆菌转化率存在差异，H99的抗性愈伤组织率为34．57％，7922为26．27％、340为21．36％、78599和921抗性愈伤组织率仅为8．02％和6．78％。基因型间差异显著；浸染培养基中加入（AS100～200mg/L）抗性愈伤转化率明显提高；菌液浓度OD600 0．5～0．6、侵染时间5～10min、萸培养时间3dZ佳。[著者文摘]
关键词:农杆菌介导法 转化频率 影响因素 抗性愈伤组织
分类号: S511 S513[机标]文献标识码：文章编号：栏目信息：研究报告
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Studies on Influencing Factors of Agrobacterium tumefaciens Mediated Maize TransformationYuan Ying， Li Qiyun， Hao Wenyuan， Tan Hua， Kong Xiangme， Zhang Guangdi， Liu Depu 1. Jilin Academy of Agricultural Sciences， Gongzhuling， 136100; 2. Agriculture Generalize Station of Lishu County， Siping， 136500Abstract:Maize inbred lines in Northeast （7922，340，78599 etc.） immature embryos calli were transformed by Agrobacterium tumefaciens （CrylA Bt.） in this report. Factors influencing transformation efficiency were studied， including pre-treatment， callus state， infection medium， infection time and co-cultivation et al.. Results showed that callus subculture for 3-5 days was suitable for transformation and that transformation efficiency of 7922 callus reached the highest of 46.6% after 5 days subculture. Dominant difference existed among different maize genotype on infection sensitivity and H99 was the most sensitive genotype with 34.57% resistant callus. Transformation efficiency was improved obviously with acetosyringone （AS） （100-200mg/L） appended in medium. In addition， bacterium concentration （OD600 0.5～0.6）， 5～10 minutes infection time and co-culture 3 days were the optimal conditions for Agrobacterium tumefaciens mediated maize transformation.[著者文摘]
Key words:Agrobacterium tumefaciens mediated transformation， Transformation efficiency， Influencing factors，Resistant calli
农杆菌介导玉米遗传转化体系的研究进展刘丽霞 李德全山东农业大学生命科学学院、山东省作物生物学ZD实验室，泰安271018摘 要:玉米（Zea mays L．）是世界上三大主要粮食作物之一，至今其遗传转化仍比较困难，目前报道有多种成功的方法，其中农杆菌（Agrobactierium tumefaciens）介导法是当前玉米遗传转化的主要方法。本文综述了农杆菌介导的玉米遗传转化研究的发展历史、存在问题和影响因素等，并对未来发展趋势进行展望。[著者文摘]
关键词:玉米 遗传转化 农杆菌
分类号: S513 S511[机标]文献标识码：文章编号：栏目信息：综述与专论
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Genetic Transformation System of Maize Mediated by Agrobactierium tumefaciens ： A ReviewLiu Lixia ，Li Dequan College of Life Sciences， Shandong Agricultural University， Shandong Key Laboratory of Crop Biology， Tanan 271018 Abstract:Maize （Zea mays L. ） is one of the three main crops of the world. Maize genetic transformation is still somewhat difficult at present. Many successful methods have been reported， of which the genetic transformation mediated by Agrobacterium is a major approach. In this review， recent progresses in genetic transformation of maize mediated by Agrobacterium， its problems， and influent factors et al. were discussed， and its future advances were also prospected.[著者文摘]
Key words:Maize （Zea mays L. ） Genetic transformation Agrobactierium tumefaciens
根癌农杆菌介导玉米遗传转化的研究进展高武军 卢龙斗 魏开发 孙富丛河南师范大学生命科学院，河南新乡453002摘 要:对根癌农杆菌介导的玉米基因转化中包括外植体、基本培养基及其附加物、共培养温度、信号分子与vir基因的活化的几个关键因素研究进展作了论述。近年来的研究发现，大小为1～2mm的幼胚是较为理想的转化外植体．在外植体培养基本培养基一般多选用MS和N6，在基本培养基上附加有机氮和氨基酸、金属离子均有利于转化效率的提高。转化中的共培养温度一般在20℃～25℃之间．研究认为根癌农杆菌转化禾本科植物的困难在于禾本科植物缺乏酚类物质，难以诱导Vir基因活化表达．因此在转化中多采用加入外源的酚类物质如乙酰丁香酮来提高玉米转化的成功率。
关键词:根癌农杆菌 玉米 遗传转化 外植体 培养基 附加物 共培养温度
分类号: S513文献标识码：文章编号：栏目信息：农业生物技术科学
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影响农杆菌介导玉米优良自交系遗传转化的因素黄雪清 卫志明ZG科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所植物分子遗传国家ZD实验室，上海200032摘 要:以我国玉米骨干自交系9046，齐319，414，Mo17的幼胚为材料，在已经建立的农杆菌介导的玉米幼胚转化体系的基础上，研究了影响农杆菌介导玉米优良自交系遗传转化的因素，建立了优化的玉米优良自交系的遗传转化体系。研究结果表明，1．0—2．0mm的玉米幼胚是Z适宜的转化受体；在感染液和共培养基中都加入乙酰丁香酮(200μmol／L)和抗坏血酸(50mg／L)，能显著提高农杆菌对玉米的侵染能力；而感染前将幼胚高渗透压预处理未能提高转化率；延迟筛选有利于提高抗性愈伤组织的存活率。应用优化后的转化体系，获得了这4个玉米优良自交系的转基因植株，PCR阳性植株率为1．71％-4．09％。转化植株叶片总DNA的PCR和Southern杂交分析表明，T-DNA上的外源基因已经整合进了玉米基因组，并且在大多数转基因植株(71．4％)中为单位点插入。这一体系的建立，为进一步将有用基因导入玉米优良自交系奠定了基础。
关键词:玉米 自交系 幼胚 农杆菌介导 转化体系 遗传转化 转基因植株 感染 PCR 阳性
