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F36G基因扩增仪的使用方法?

一棉天行健    2012-11-26    DNA合成仪    浏览 538 次

精彩问答
沙漠之鹄 发布日期:2012-11-27
一:PCR的基本原理
(一)PCR的基本反应步骤
PcR技术又称聚合酶链式反应,类似于DNA的大然复制过程
3个基本反应少骡构成。
1.模板DNA的变性
模板DNA就是浴安复制的DNA片段,模板DNA加热至93℃左右一定时间后,连接碱基的氢键在高温厂断裂,使DNA双链或纤PcR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单镕,并成为下步扩增反应的模板。
2.模扳DNA与引物的退火(复性)
引物是一小段人工合成的20一30个碱基单链DNA或RNA,也是聚合酶链式反(PcR)‘[IA工合成的复制起始点,每一条引物都与持扩增的靶区域是特异互补。PCR反应体系中需加入 对。 股在55℃左右,引物就会勺模板DNA单链肋力:补序列配对结。
3.引物的延伸
DNA模板与引物结合物在Tq DNA聚合酶的作均下,以侧为反应原料,靶序列为模板,技碱苯配对原理,合成一条新的州A互补链。新合成的DNA链并不是整个DNA链,而是由引物界定的、生物体特异的loo一枷个碱基对的靶序列。
TN DNA聚合酶是种来源于嗜热水生卤的重组的热稳定的DNA聚合两、聚合酶所不同的是在高温状态仍具有活性。
4.DNA扩增
重复以卜变性、退火、延伸=个过程,就可状得更多的洲A链,这—过程巾新合成的新链又可成为下次循环的模板,使产物的数量按24方式增长。从形论上讲,经过25—30个循环后DNA可扩增ld一10’倍。
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