茶花女论文的目录

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目 录 1

摘 要 3

英文缩略词表 6

一 前 言 7

1.1大肠杆菌表达系统简介 7

1.2 碱性成纤维细胞生长因子概述 7

1.2.1 国内外研究概况 8

1.2.2 碱性成纤维细胞生长因子基因 8

1.2.3 bFGF的三维结构及功能域 9

1.2.4 bFGF的功能活性 10

1.3 本实验的思路和方法 11

二 实验设备和材料 13

2.1主要仪器 13

2.2 实验材料 13

2.2.1 菌种与质粒 13

2.2.2 DNA材料 13

2.3 常用试剂 14

2.4 培养基 14

2.5 酶类 15

2.6 分子量参照物 15

2.7 试剂与母液的配制 16

三 实验过程 20

3.1 PCR法合成hbFGF编码区序列 20

3.1.1覆盖hbFGF编码区序列引物的获得 20

3.1.2 PCR反应条件 22

3.1.3 PCR产物的纯化 22

3.1.4酶切PCR产物 22

3.2 pET-3C载体的制备 23

3.3 hbFGF基因与pET-3C载体的连接 24

3.4 连接产物的转化 24

3.5 重组子的鉴定 25

3.6 重组子在表达载体中的表达 25

3.7 重组子的诱导表达与可溶性分析 25

3.8 重组蛋白的纯化 25