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MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项?

逮屁花神    2011-03-31    比色计    浏览 479 次

MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项?

精彩问答
a91549865 发布日期:2011-04-01
博凌科为解答:(1)选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT比色法细胞活力检测实验前,掌握每一种细胞的贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证形成酌量的MTT结晶,与细胞数量呈线性关系。 (2)避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高浓度的血清物质会影响实验孔的光吸收值。由于实验本底增加,会使实验敏感。因此,一般选择浓度小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。3)设空白对照。与实验孔平行设不加细胞只加培养液的空白孔。其它实验步骤保持一致。Z后比色时,以空白孔调零。
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