AKTA蛋白纯化系统分离时电导率变化意味着什么？求！

liuying0027 2012-05-02 电导率仪浏览 799 次

使用AKTA分离纯化蛋白的时候，280nm检测一直没有变化，但是电导率在某一时间出现几个峰值，如何解释？

精彩问答

gtbhtrhy 发布日期：2012-05-22

电导率变化说明洗脱液中的盐浓度变了，如果你做的是梯度洗脱的话，280nm没有一点反应，那你可以提高你的盐浓度。或者直接做个0-1的梯度！

想问下你是什么填料？如果你的缓冲液没有问题，那么就是有种可能，你的柱子在上次使用后没有再生，也就是还有东西在柱子上面，被你的缓冲液给洗脱下来了，这种物质在280处没有吸收。建议你用1M的NaOH冲下柱子，根据你填料的性质也可以提高NaOH的浓度，但GE的胶一般不超过2M。

你观察下你的电导开始起峰的体积减去你的柱体积，得到的体积在unicorn里面的logbook里有什么操作没？

你也可以把你的原始图谱发给我看看！

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全部评论

韩静菲1 发布日期：2012-05-11

可能是你加入样品是引入的盐浓度的变化

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大时代910 发布日期：2012-05-03

电导率是检测你溶液中的盐浓度的变化。

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pp800331 发布日期：2012-05-11

如上所说，电导率变化说明你的溶液离子浓度变化，引起的原因可能是1.你更换了溶液，但这个溶液的更换未能使你的目的蛋白被洗脱，所以UV检测未变化而电导变化了；2.如果是同一溶液，那么可能是你的溶液配置时未完全混匀，导致离子浓度不均一。希望我的回答对你有帮助。

问一下，你用的是上面柱子？

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