建立了毛细管电泳?激光诱导荧光检测(CE?LIFD)技术测定人血浆中富马酸比索洛尔含量的新方法。选用荧光素异硫氰酸酯（FITC）为衍生化试剂，当缓冲溶液为25 mmol/L Na2B4O7（pH 9.2）、分离电压25 kV、柱温20 ℃、电动进样（10 kV×8 s）、以峰面积内标法定量、于激发波长/发射波长= 488/520 nm柱上检测时，富马酸比索洛尔得到较好分离。在选定的电泳条件下，对其线性范围(20～1000 μg/L)、检出限(10 μg/L)、重现性(日内和日间精密度分别小于4.44%和5.59%)和回收率（96.19％～101.80％）进行了测定。结果表明： 迁移时间的重现性＜1.58%；峰面积之比的重现性＜6%。
准确称取富马酸比索洛尔和酒石酸美托洛尔各5 mg，加水溶解，分别定容至50 mL，配制成100 mg/L 标准储备液，4 ℃冰箱放置，备用。
准确称取5 mg FITC溶于5 mL乙腈中，配制成2.5 mmol/L储备液，临用前用乙腈稀释至所需浓度。
2.3 空白血浆的制备
健康人空腹，于肘静脉处取血，放于装有肝素钠抗凝剂的离心管中，30 ℃静置，然后以3000 r/min 离心10 min，取上清液于另一离心管中，－20 ℃冰箱中冷藏备用。
2.4 生物样品前处理
取肝素化的含药血浆1 mL，置10 mL 离心管中，同时加入20 μL 内标溶液，加0.2 g NaCl及50 μL浓氨水，旋涡振荡30 s 后，加入醋酸乙酯3.0 mL。为防止乳化现象，于室温下静置2 min 后，再用快速混匀仪混旋提取1 min，以3000 r/min 离心3 min，移取上层有机层至另一离心管中，40 ℃下N2 流吹干，得富马酸比索洛尔和内标的残留物。
2.5 荧光衍生化反应
在上述残留物中加入0．5 mmol/L FITC 乙腈液400 μL，再加入200 mmol/L Na2HPO4水溶液200 μL和400 μL水，室温，暗处放置过夜。衍生后产物用水稀释至2 mL，上机分离。
2.6 实验方法
将血样进行预处理，以FITC为衍生化试剂，考察影响衍生化的重要因素，并用美托洛尔为内标物，确定富马酸比索洛尔衍生物与其分离的Z佳电泳条件。实验前，缓冲液超声脱气10 min，每天开机时分别用0.1 mol/L NaOH、超纯水、缓冲液冲洗毛细管柱3 min，运行5次后更换新的缓冲液，以确保分析结果的重现性。
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