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小分子水溶性分析物和极性化合物色谱柱 - ACE C18-A

菲罗门色谱柱    2019-05-30    色谱柱    浏览 681 次

ACE® C18-Amide
• 用于方法开发的替代选择性
• 改善极性、酸性、碱性和酚类化合物的分离
• 用于UHPLC和HPLC的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm颗粒
• 超惰性,可获得Z佳性能和可重现性

ACE C18-Amide液相色谱柱
用于提高极性保留和替代选择性
方法开发的理想色谱柱选择
■ 相对C18和C8色谱柱,对极性分子 - 特别是酸类,具有替代选择性
■ 与水含量的流动相兼容
■ 用于UHPLC、HPLC和制备型分离的高柱效2μm、3μm、5μm和10μm颗粒
■ UV和LC/MS兼容性的低流失

推荐应用
■ 小分子水溶性分析物和极性化合物
■ H键给予体、酸类、碱类和酚类化合物
■ 小分子多肽





为什么ACE C18-Amide液相色谱柱可以提供替代选择性?

■ ACE C18-Amide将C18与极性酰胺基结合在单一配体上
■ 延长间隔区技术可以额外延长色谱柱的使用寿命


利用ACE C18-Amide液相色谱柱的选择性能力将色谱峰分开
分离度方程可以确定影响分离度的参数:N、α和k。近年来,
ZD关注使用超GX“UHPLC”色谱柱(如ACE Excel 2μm色
谱柱)作为实现分离目标的手段。

然而,选择性往往被忽视。

在影响分离度的三个参数中,选择性是Z为重要的(参见图1)。

通过利用柱效和选择性,通常可以实现更好和更快的分离。
ACE C18-Amide液相色谱柱是ACE系列键合相的Z新产品,其可以提供互补选择性和2μm、3μm、5μm和10μm粒径的选择,以开发坚固耐用的UHPLC和HPLC方法。

图1 N、α和k对分离度(Rs)的影响
对于N = 10,000、k = 4和α= 1.1的典型分离

增加N、α或k可以增加分离度(Rs),但是从上图可以看出,N或k的增加都会迅速降低回报率。增加选择性(α)则不会发生这个问题,因此其在开发分离方法时是这三个变量中Z为重要的优化参数。


利用ACE键合相的固定相选择性能力将色谱峰分开
图2阐明了两种ACE键合相即C18-Amide与C18之间的差异。

尽管这两种键合相均可以提供可能的来自它们各自C18链的强疏水作用,但嵌入C18-Amide相中的酰胺基会引入额外的相互作用模式,Z终增加极性化合物的保留并提供替代选择性。

样品:1)间苯二酚 2)儿茶酚 3)2-甲基间苯二酚 4)4-甲基邻苯二酚5)3-甲基邻苯二酚 6)4-硝基邻苯二酚
流动相:25:75乙腈/27mM H3PO4(溶于水中)
色谱柱尺寸:150 x 4.6mm

流速:1.50ml/min

温度:30℃
波长:270nm


ACE C18-Amiede液相色谱柱可以使极性选择性增强

ACE C18-Amide与lingxianC18 UHPLC色谱柱的比较


色谱柱尺寸:50 x 2.1mm
样品:1)间苯二酚 2)儿茶酚 3)2-甲基间苯二酚 4)4-甲基邻苯二酚 5)3-甲基邻苯二酚 6)4-硝基邻苯二酚
流动相:25:75甲醇/25mM H3PO4(溶于水中)
流速:0.30ml/min
温度:30℃

波长:214nm
比较数据不代表所有应用。


利用替代选择性来进行方法开发

酸性、碱性和中性化合物的分离

样品:1)甲基苯基亚砜 2)吲哚洛尔 3)3-羟基苯甲酸 4)1,2-二甲氧基苯 5)小檗碱 6)杨梅素 7)胡椒碱 8)白杨素
流动相:A = 20mM甲酸铵(溶于水中)(pH 3.0)B = 20mM甲酸铵(pH3.0)(溶于90:10(v/v)甲醇/水中)

梯度:在5分钟内3 – B
色谱柱尺寸:50 x 2.1mm

流速:0.60ml/min

温度:40℃

波长:254nm


与水含量的流动相兼容

葡萄酒中有机酸的分离

样品:1)草酸 2)酒石酸 3)苹果酸 4)乳酸 5)抗坏血酸 6)柠檬酸
流动相:40mM NH4H2PO4(溶于水中)(pH 2.5)
色谱柱:ACE Excel 3 C18-Amide, 250 x 2.1mm

流速:0.21ml/min

温度:25℃

波长:214nm


ACE C18-Amide可以提供替代选择性

食品和饮料添加剂 - 香草醛


样品:1)香草酸 2)4-羟基苯甲酸 3)香草醛 4)4-羟基苯甲醛 5)愈创木酚 6)乙基香草醛 7)丁香酚
流动相:A = 0.1%甲酸(溶于水中) B = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)

梯度:在10分钟内30 – 55% B
色谱柱尺寸:150 x 4.6mm

流速:1.00ml/min

温度:40℃

波长:260nm


类固醇


样品:1)泼尼松 2)泼尼松龙 3)雌三醇 4)皮质酮 5)11a-羟孕酮 6)11-酮孕酮 7)21-羟孕酮 8)β-雌二醇 9)17α-雌二醇 10)17α-乙炔基雌二醇
流动相:A = 0.1%甲酸(溶于水中) B = 0.1%甲酸(溶于乙腈中)

梯度:在10分钟内25 – 80% B
色谱柱尺寸:50 x 2.1mm

流速:0.40ml/min

温度:25℃

波长:260nm


有保证的可重现性和完全可扩展性

ACE C18-Amide的可重现性扩展

样品:1)尿嘧啶 2)4-羟基苯甲酸 3)乙酰水杨酸 4)苯甲酸 5)2-羟基苯甲酸 6)对羟基苯甲酸乙酯
流动相:35:65乙腈/0.1%TFA(溶于水中)

温度:22℃

波长:254nm

将可用的2μm、3μm、5μm和10μm粒径与从UHPLC到制备型HPLC规模的一系列柱尺寸相结合,可确保方法可重现地放大或缩小。
图8中的色谱图显示,当硅胶批次和硅烷批次改变时可以获得zhuo越的可重现性,并当粒径和柱直径改变时可以获得可重现的可扩展性。

 



产品的可用性和规格  


 

官能团  

封端

粒径(µm)

孔径(Å)

表面积(m2/g)

碳载量

Z大pH范围

水相兼容

USP列表

ACE C18-Amide   

具有完整酰胺极性基团的十八烷基    

2, 3, 5, 10

100

300

16.4   

2.0-8.0a  

Yes

L1/L60



 

 


 

 


 

 

为了获得Z佳色谱柱寿命,推荐使用2-8的pH范围。为了在较高的pH值下增加色谱柱寿命,必须考虑有机缓冲液、低缓冲液浓度、高%有机溶剂和低温。
为了在HPLC条件(高达5000psi/350bar)下进一步延长色谱柱寿命,推荐使用ACE保护柱芯柱或ACE HPLC柱前过滤器。
为了在UHPLC条件(高达15000psi/1000bar)下进一步延长色谱柱寿命,推荐使用ACE UHPLC柱前过滤器。
对于高达5000psi(350bar)的HPLC色谱柱连接器,推荐使用PEEK手紧接头(p/n ACE-CC10)。
对于高达15000 psi(1000bar)的UHPLC色谱柱连接器,推荐可重复使用的接头(p/n EXL-CC10)。

ACE®Advanced Chromatography Technologies Limited的注册商标。ACE Excel™Advanced Chromatography Technologies Limited的商标。Advanced Chromatography Technologies Limited承认Agilent Technologies Inc.Phenomenex Inc.Thermo Fisher ScientificWaters Corporation的注册和未注册商标,且与上述这些公司没有任何隶属关系。


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