答:注意事项:
1、 裂解液要预热,以YZDNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解。
2、 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护。氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护。
3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。
4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。
5、 异丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要预冷,以减少DNA的降解,促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。
6、 提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。
7、 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
标准的目标校准包括两方面:1)确认校准系数;2)检查零点和跨度。仪器在出厂时做过精确校准。校准系数相对稳定,
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杂质:多酚类、糖类物质较多 去除方法:材料粉碎后,在加细胞裂解液前,加入一些缓冲液清洗来除去多糖:缓冲液配比
有各种原因都可以影响DNA提取 *************************************
CTAB法可以的,通用于真菌DNA提取, diyi步使用液氮研磨破壁,非常重要,后面都是抽提掉蛋白等杂质.
1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量.2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组