半干转
在半干转中,由滤纸、凝胶、滤纸组成三明治,将三明治浸入转膜缓冲液中,在正负电极之间直接放置,在转膜中,将凝胶和负极靠近,将膜和正极靠近,非常重要。半干转的转膜缓冲液中Tris和甘氨酸的比例不一定相同于湿转,48 mM Tris39mM甘氨酸、0.04%SDS、20%甲醇为标准配方,应当对仪器制造商的实验方案进行参考。
湿转
在湿转中,在海绵和滤纸之间紧紧地夹着在海绵和滤纸。(由下至上依次海绵、滤纸、凝胶、膜、滤纸、海绵),使气泡不会在凝胶与膜之间形成得以确保。在转膜缓冲液中浸泡这三明治结构,对其施加电场。负电荷蛋白移向正极,在膜上结合,并对其继续移动进行阻止。1tris甘氨酸缓冲液为湿转的标准缓冲液与跑胶缓冲液所使用的缓冲液,然而SDS却没有,并且将甲醇加入至终浓度20%,建议在转膜缓冲液中相对于分子量大于100kd的蛋白来说将终浓度为0.1%的SDS加入
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