在平时的实验中,相信大家都碰到过这些情况:样品摩尔吸光系数太弱、只在短波长区(<210nm)有吸收或是样品量太少。这时,我们在紫外检测器上看不到明显的吸收,只能被迫走全收集模式。全收集模式的弊端是:不仅看不到出峰情况、无法及时更改梯度,而且会有一些不可避免的样品组份交叉,影响分离效果与分离时间。
那么,有其他检测器可以有效地检测到这些物质吗?答案是肯定的。
蒸发光散射检测器(ELSD)是一种通用型检测器。不同于紫外和荧光检测器,ELSD的响应不依赖于样品的光学特性——任何挥发性低于流动相的样品均能被检测,不用考虑其官能团的ZD吸收波长或摩尔吸光系数等影响。
ELSD的响应值与样品物质的量呈指数关系,一般需经对数转换,因而具有高灵敏度并可以用于检测未知物。
另一种常见的通用型检测器是示差折光检测器,其缺点是:不仅对温度、流动相浓度等要求苛刻,无法用于梯度洗脱;且灵敏度不如ELSD。所以,当被测物无UV吸收或者仅有很小的吸收值(ε<100)、流动相又不允许用短波长进行UV测定时,如:碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸等;或是被测物浓度较低时,我们都可以考虑使用ELSD来进行检测。
图1:ELSD可以清楚地“看”到UV检测器“看”不到的东西
ELSD的结构如下:首先,样品与流动相混合在一起进入雾化器中,被惰性气体雾化;随后,在加热漂移管中,流动相被蒸发,只留下挥发性低于流动相的样品进入散射池;在激光照射下产生散射光,散射光的强度与组分的浓度成正比;ZH,经光电检测器产生电信号,放大后转换成色谱图被记录下来。
图2:ELSD的结构图
ELSD可检测任何挥发性低于所使用流动相的样品,且通过精确控制气压与温度,样品可在一个较低温度下被雾化和蒸发,保持了对热不稳定和挥发性化合物的高灵敏度。同时,因为ELSD会将流动相蒸发掉再检测,所以无需像紫外检测器一样考虑流动相干扰,也可用于梯度分离。ZH,辅助载气包裹下的样品颗粒不会分散和沉淀在检测池壁上,极大提高了检测灵敏度,减少检测池表面污染。
但,在拥有上述优点的同时,ELSD也具有相对较昂贵的价格和较繁琐的操作,还需配备氮气等惰性气体。另外,ELSD分流出来用于检测的极小部分样品也会直接通入通风橱中损失掉无法回收,对于一些非常贵重的样品而言会有一点损失。
总体而言,ELSD是补充紫外检测器功能的最 佳选择。
图3:紫外与蒸发光散射检测器对比
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