干货丨CNW MCS 专用小柱助力豆芽中10种植物生长调节剂的检测

       豆芽是餐桌上比较常见的一种蔬菜，很多人都喜欢吃，但是“毒豆芽”事件层出不穷，导致人们吃豆芽时又多了几分顾虑。

       据一些科研文献的报道，有些植物生长调节剂对动物可能存在一定的毒性，但是这些毒理学实验研究所使用的植物生长调节剂剂量相对较高。2015年4月国家食品药品监督管理总局、农业部和国家卫生计生委联合发布了关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告（2015 第11号），明确表示6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、赤霉素等作为低毒农药登记管理并限定了使用范围，豆芽生产不在可使用范围内，明确规定豆芽生产和经营过程禁止使用上述物质。

       安谱实验根据目前主流的检测方法，开发出自己的MCS 专用小柱，利用小柱净化，LC/MSMS 检测的方法，对常见的10 种植物生长调节剂进行测定，操作简便，回收率高。

一、样品前处理

1. 试样的制备和保存：

将待测样品粉碎混匀待用, 称取试样后将剩余试样放置于-20℃冰箱中保存备用，尽快分析。

2. 提取：

称取试样5.00g 于50ml 离心管中，加标0.5mL(1ppm), 加入20μL甲酸，再加入20mL 乙腈，漩涡混匀1min左右，然后超声5min, 超声结束冷却后10000rpm 离心机离心5min，上清液转移至新的 50ml离心管中，然后加入2.0gNaCl( 使其饱和有结晶)，漩涡混匀2min 后10000rpm 离心2min，吸出2mL 乙腈相入试管中，50℃下用氮气吹干，加入0.2mL 甲醇漩涡溶解，再加入3mL 40mmol/L 的盐酸溶液混匀，转移至离心管内，10000rpm 离心机离心5min，分出上清液待净化。

3.SPE 过程：

先用 5mL 甲醇、5mL 水、5mL 40mmol/L 的盐酸溶液活化小柱（SBEQ-CA71AP），活化结束后, 将提取液转移到小柱中，待样品过柱后，用 5ml 水淋洗除杂，真空抽干 5min，加入 5mL 甲醇洗脱收集于 15ml离心管内，抽干得洗脱液 1；再用 5mL5% 氨化甲醇洗脱，收集于15ml离心管内，得洗脱液 2；洗脱液 1 和 2 在50℃下用氮气吹干，分别加入0.1mL 甲醇超声溶解残留物，再加入 0.9mL 10% 甲醇/ 水溶液混匀，过 0.22μm 滤膜后待 UPLC-MS/MS 分析。洗脱液 1 用于分析GA3,2,4-D,4-CPA,IAA,IBA( 赤霉素、2，4-D、4- 氯苯氧乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸)5 种植物生长调节剂，洗脱液 2 用于分析LBN,SBL,6-BA,DXZ,6-KT( 氯吡脲、噻苯隆、6-BA、多效唑、6-KT)5 种植物生长调节剂。

二、色谱条件

液质联用色谱质谱仪：ACQUITY UPLC 超高xiao液相色谱仪 ( 美国Waters 公司)，串联AB 5500 型三重四极杆质谱仪( 美国AB SCIEX 公司)，配电喷雾离子源 (ESI)

液相条件:

色谱柱： Athena UPLC C18（2.1*50mm，1.8um）

流动相： A 乙腈(%) B 5mM/L 乙酸铵溶液(%)

流速：0.45mL/min

柱温：30℃

进样量：1ul

采集模式：MRM

质谱参数:

三、实验谱图

▲豆芽基质吲哚乙酸50ppb加标

▲豆芽基质赤霉素 50ppb加标

▲豆芽基质吲哚丁酸50ppb 加标

▲豆芽基质2,4-D 50ppb 加标

▲豆芽基质多效唑50ppb 加标

▲豆芽基质氯吡脲 50ppb 加标

▲豆芽基质6-KT 50ppb 加标

▲豆芽基质6-BA 50ppb 加标

▲豆芽基质4- 氯苯氧乙酸 50ppb 加标

▲豆芽基质噻苯隆 50ppb 加标

四、实验数据

五、实验耗材

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