一、DNA带模糊
原因:
1.DNA降解;
2.电泳缓冲液陈旧;
3.所用电泳条件不合适;
4.DNA上样量过多;
5.DNA样含盐过高;
6.有蛋白污染;
7.DNA变性。
解决办法:
1.避免核酸酶污染;
2.电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;
3.电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;
4.减少凝胶中DNA上样量;
5.电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐;
6.电泳前酚抽提去除蛋白;
7.电泳前勿加热,用20mM NaCI缓冲液稀释DNA。
二、带弱或无DNA带
原因:
1.DNA的上样量不够;
2.DNA降解;
3.DNA走出凝胶;
4.对于EB染色的DNA,所用光源不合适。
解决办法:
1.增加DNA的上样量;聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低;
2.避免DNA的核酸酶污染;
3.缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;
4.应用短波长(254nm)的紫外光源。
三、DNA带缺失
原因:
1.小DNA带走出凝胶;
2.分子大小相近的DNA带不易分辨;
3.DNA 变性;
4.DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适。
解决办法:
1.缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;
2.增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度;
3.电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM NaCl Buffer稀释DNA;
4.在脉冲凝胶电泳上分析。
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一
dna电泳检测某扩增产物条带过多,原因 说明扩增特异性较差。建议做以下调整:1、降低镁离子浓度;2、提高
从事口罩微生物检测的朋友都知道,在菌落总数检测时,经常添加TTC这种物质,哪什么是TTC?添加TTC又有什么
前言聚合酶链式反应(PCR)是用于扩增特定DNA片段的分子生物学实验技术。实时荧光定量PCR(以下简称qPC
4月20日安谱实验学堂举办了室内环境检测常见问题专 题培训,邀请了资 深环境检测专家李云龙老师就五个常见室内环境
美学是一个哲学范畴的概念。自然界按照简单、对称、和谐、统一、有序的美学原则构建而成。自然科学的研究对象是自然
2022年国家颁布的《新污染物治理行动方案》中指出,新污染物是指新近发现或被关注,对生态环境或人体健康存在风
目前设计的自动进样器进入评价阶段,对常见问题不是特别了解,求赐教 好强大,是自己做液相自动进样器的呀?这
色谱常见问题是什么... 色谱常见问题是什么 展开 问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂
闸机维修常见问题自发性开门关门... 闸机维修常见问题自发性开门关门 展开 闸机门禁系统常见问题与