参考GB/T 38093-2019凝胶色谱法测定β-内酰胺类抗生素高分子聚合物

β-内酰胺类抗生素分子自身聚合而成的产物，也称为高分子聚合物（简称高聚物），其可在生产或储存过程中产生，甚至也可在药物的不当使用过程中产生。随着现代制药工程在生产工艺方面的不断改进和提高，目前抗生素的产品中外源性杂质日趋减少，对内源性杂质的控制成为当前抗生素高分子杂质质量控制的ZD。 

本应用参考国标GB/T 38093-2019，采用凝胶色谱柱TSKgel G2000SWXL，对头孢噻吩、头孢曲松、头孢呋辛、头孢拉定、头孢哌酮及头孢唑林这6种β-内酰胺类抗生素进行分离，经紫外检测器在254 nm测定，以色谱峰保留时间定性，以峰面积进行定量。

溶液的配制

① 流动相配制：(5 mmol/L 磷酸缓冲盐，pH=7.0) : ACN=9:1 (v:v)

② 对照品溶液配制：取头孢曲松、头孢噻吩、头孢拉定、头孢呋辛少量用 (5 mmol/L 磷酸缓冲盐pH=7.0) 溶解并稀释至1 mg/mL，取头孢哌酮、头孢唑啉少量用 (5 mmol/L 磷酸缓冲盐，pH=7.0) : ACN=1:1 (v:v) 溶解并稀释至1 mg/mL

分析条件

仪器：Thermo Ultimate 3000  

色谱柱：TSKgel G2000SWXL（7.8 mmI.D.×30 cm, 5 μm）

流速：0.8 mL/min

柱温：25 ℃

样品盘温度：10 ℃

进样量：10 μL

检测器：紫外检测器@254nm

分析结果

图1. 头孢噻吩分离色谱图

图2. 头孢曲松分离色谱图

图3. 头孢呋辛分离色谱图

图4. 头孢拉定分离色谱图

图5. 头孢哌酮分离色谱图

图6. 头孢唑啉分离色谱图

标准曲线建立（以头孢噻吩为例）

结果与讨论:

采用TSKgel G2000SWXL色谱柱参考GB/T 38093-2019，对头孢噻吩、头孢曲松、头孢呋辛、头孢拉定、头孢哌酮及头孢唑林6种β-内酰胺类抗生素进行了分离测试。

结果表明：6种β-内酰胺类抗生素主峰与相关物质峰的分离良好，主峰柱效均大于10000，以头孢噻吩为例做标准曲线，浓度范围为0.009~5.14 mg/mL，其线性R²=0.9977 (高于标准中的要求R²＞0.95) , 满足国标要求。