GX液相色谱柱是消耗品,会随着使用时间或进样次数的增加,出现柱效下降无法达到分离要求,或伴有峰型拖尾、分叉等情况。需要定期进行清洗和再生,以保证色谱柱的柱效和使用寿命。
不同类型的色谱柱都有与之对应的清洗方法。本文为大家介绍TSKgel SW系列硅胶尺寸排阻色谱柱的清洗方法。
根据样品性质,建议先从以下①和②中选择适当的清洗方法,每一步清洗之间用纯水冲洗。清洗色谱柱时的流速与溶剂替换流速一致。
1 去除离子性杂质
使用高盐浓度的流动相(例如:0.5M硫酸钠,pH3溶液)或酸性水溶液(例如:磷酸盐缓冲液,pH2.5)过柱清洗。
2 去除疏水性杂质
在清洗液中添加10-20%的甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂过柱清洗。
如果采用上述两种方法清洗后色谱柱性能仍不能恢复,再考虑以下第③种方法。
3 去除难溶性蛋白质或其他物质
在清洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性表面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后过柱清洗。但需要留意的是尿素或中性表面活性剂可能会残留在色谱柱上。
一般来说,清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。在吸附成分其吸附力极强时,即使进行过清洗,色谱柱性能也有可能得不到恢复。另外,请充分考虑清洗液的pH值,以避免损坏色谱柱。
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