色谱法是一种分离混合物中各组分的分析技术。色谱柱是色谱中使用的仪器的一部分。使用柱的五种色谱方法是气相色谱(GC),液相色谱(LC),离子交换色谱(IEC),尺寸排阻色谱(SEC)和手性色谱。色谱的基本原理可以应用于所有五种方法,今天我们分享其中两种方法——气相色谱柱和GX液相色谱柱。
气相色谱柱
在气相色谱中,流动相是气体。气相色谱柱的长度通常在1至100米之间。气相色谱法(GC):液相固定相结合或吸附到毛细管柱的表面上,或结合到柱内填充的固体载体上。匹配分析物和固定相的极性两者具有相似的极性,固定相的厚度在0.1到8 µm之间,而厚度越厚,分析物的挥发性就越大。
液相色谱柱
GX液相色谱(HPLC)是液相色谱的一种。液相色谱柱共有三种基本类型:液-液,液-固和离子交换。液-液色谱柱不那么受欢迎,因为它们的稳定性有限且不方便。在液-固色谱柱中,固定相为固体,分析物吸收到固定相上,从而分析混合物的成分。通常,HPLC在分析柱之前有一个保护柱,以保护并延长分析柱的使用寿命。保护柱的作用是去除色谱柱上不可逆的颗粒物、污染物和分子等。
最常见的HPLC色谱柱由不锈钢制成,也可以由厚玻璃,聚合物(例如聚醚乙酮),不锈钢和玻璃的组合或不锈钢和聚合物的组合制成。采用不锈钢材质的好处有很多,比如不锈钢相较于玻璃这种材质,更加的耐腐蚀,耐高压,耐磨损,使用寿命更长,这样也能很好的降低使用成本。典型的HPLC分析柱长3至25 cm,直径1至5 mm。与GC色谱柱不同,这些色谱柱通常是直的。填充柱的颗粒的典型直径在3至5 µm之间。当色谱柱内部堆积的颗粒直径减小时,液相色谱柱的效率将会提高。
峰或峰展宽会导致色谱柱效率降低。理想的情况将是尖锐的峰被解决。物质在色谱柱中停留的时间越长,将导致峰变宽。加长色谱柱是改善色谱柱中不同物质分离的一种方法。恒谱生色谱柱高流速,低背压,可累加柱效,高柱效、分离度佳,平衡时间短,缩短分析时间,节约溶剂。恒谱生色谱柱管有多种规格尺寸,比如4.6*50、4.6*100、4.6*150、4.6*250等,0.1μ、0.4μ的光洁度可选。
色谱柱通常需要保持恒温,以保持效率。塔板高度和理论塔板数决定了色谱柱的效率。提GX率将是增加板的数量并减小板的高度。
板数可以通过以下公式确定:
ñ=大号/ ħ(1)(1)N=L/H
其中L是列的长度,H是每个板的高度。
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型号代码:AGILENT TECHNOLOCIES INC CATALOG 190912-413 30m,
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