血液分析是动物健康和福利控制中非常重要和强大的诊断工具。它通常在高等脊椎动物中进行,其参考值已经确立,但鱼类血液学仍需要进一步研究。许多内在和环境因素对鱼的血液学值有深远的影响,使参考值的确定变得困难。此外,由于凝血时间短,鱼血通常需要添加抗凝剂。抗凝剂的选择对于获得可靠的血液检测值至关重要。在本研究中,两种常见的抗凝剂的影响,K 2 EDTA(1.8毫克/毫升)和肝素锂(18国际单位/毫升),在养殖的斑鳟血液学值褐鳟对产卵季节的产卵者进行了调查。
基本血液学分析的结果,例如压实细胞体积 (PCV)、血红蛋白浓度 (HGB)、红细胞计数 (RBC)、平均红细胞血红蛋白 (MCH)、平均红细胞体积 (MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度 (MCHC)和白细胞计数 (WBC),在K 2 EDTA和肝素锂之间进行了比较。在 PCV、MCV 和 MCHC 中观察到统计学上的显着差异,而 HGB、RBC、MCH 和 WBC 没有显示出这种差异。这些结果表明肝素锂提供了更可靠的结果,因为 K 2 EDTA 处理的样品中的红细胞有膨胀的趋势。
乙二胺四乙酸 (EDTA) 的盐类被国际血液学标准化委员会 (ICSH) 和临床和实验室标准研究所 (CLSI) 推荐为血细胞计数的shou选抗凝剂 。EDTA 作为 Ca 2+和 Mg 2+离子的螯合剂。它结合钙,对于凝血级联中的酶促反应必不可少,从而产生抗凝作用,对细胞形态的影响最小。EDTA 可以最可靠地保存染色血膜上的细胞,它常用于人类、哺乳动物和其他脊椎动物的常规血液学测试。它还在鱼类中取得了一些成功 。然而,EDTA 盐有一些缺点。在某些情况下,它们会导致血液溶血,尤其是在用未缓冲的三卡因甲磺酸盐 (MS 222) 麻醉的标本中。
肝素盐主要用于临床生物化学。它阻止凝血酶原转化为凝血酶(因子 II),从而抑zhi纤维蛋白原转化为纤维蛋白。根据一些爬行动物和鸟类的 EDTA 保存的血液样本中溶血的报道很少,建议在对有红细胞的动物进行血细胞计数时使用肝素。出于这个原因,许多作者使用肝素作为鱼类血液学中shou选的抗凝剂。然而,肝素并不能完全阻止白细胞和血小板聚集,这会导致样本凝固,并且还会产生 Wright 染色的血涂片的蓝色背景染色。另外它也比其他抗凝剂更昂贵。
一些研究者观察到从 EDTA 和肝素盐中获得的 HGB 和 RBC 存在显着差异,肝素锂比乙二胺四乙酸二钾更适合用于养殖鳟鱼产卵的血液学评估。肝素不会影响红细胞的大小,从而将溶血的可能性降至zui低,与肝素相比,用EDTA处理的血液制成的血液涂片质量更高。根据目前的研究,我们建议K2EDTA可以谨慎地用于血细胞计数和HGB的测定。为了更好地了解抗凝剂对血液学参数的影响,还需要进一步的研究。
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