HEPES是两性离子有机化学缓冲剂,属于二十个 Good 的缓冲区之一,它不与金属离子结合,极易溶于水。经常被添加到细胞培养基中使用。虽然它对细胞没有营养,但是在细胞培养需要在 CO2 培养箱外进行长时间操作时,添加 10–25 mm HEPES 可提供额外的缓冲能力孵化器为细胞提供一个良好的PH环境。
HEPES 缓冲区具有以下特征:
HEPES 的 pKa 取决于温度:例如①在 25ºC:pKa= 7.48 ②在 37ºC:pKa= 7.31
在水溶液中有良好的溶解性,水溶液无色透明;
化学性质稳定,对生物没有毒性且对生物膜无明显的渗透作用:
对紫外波无特征吸收,在波长小于230-240nm时才有微弱的吸收,因而不干扰通常的光度法测量。
不易受温度、离子组成、浓度等因素影响解离度
HEPES除了在细胞培养基中的使用之外在其他生物研究中,也占有非常重要的地位,因为它不与金属离子结合,所以在很多金属离子研究中都可以使用它,它是三羟甲基氨基甲烷与磷酸盐的良好替代品。HEPES 也是电子显微镜中蛋白质沉积技术的常用缓冲液,因为它不会影响金属基材。经过评估并证明HEPES适合与两性化合物一起使用,为等电聚焦应用产生小于 1 个 pH 单位宽的 pH 梯度。在谷氨酸结合试验的推荐缓冲液中,HEPES也是作为shou选缓冲液,因为它可以防止与非受体材料结合。
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